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KLF5在 TNFα诱导的 SK-BR-3乳腺癌细胞凋亡中的作用
目的探讨肿瘤坏死因子α（ TNFα）对 SK-BR-3乳腺癌细胞中 Krüppel 样因子5（KLF5）表达的影响，明确KLF5在TNFα诱导SK-BR-3乳腺癌细胞凋亡中的作用。方法用不同浓度TNFα（0、1、5、10、20μg/L）刺激SK-BR-3乳腺癌细胞不同时间（0、6、12、24、36 h），采用Western印迹方法检测KLF5表达水平；用实时定量PCR（ qRT-PCR）检测TNFα刺激对SK-BR-3乳腺癌细胞凋亡基因表达的影响， qRT-PCR和流式细胞术观察过表达KLF5对SK-BR-3乳腺癌凋亡的影响。结果TNFα刺激SK-BR-3乳腺癌细胞后，随着刺激浓度的增高，KLF5表达水平呈剂量和时间依赖性逐渐降低。 qRT-PCR结果显示，TNFα可上调SK-BR-3乳腺癌细胞凋亡基因cascpase3、caspase9和bax表达，并下调bcl-2表达水平。构建pAd-GFP和pAd-GFP-KLF5腺病毒表达载体，在SK-BR-3乳腺癌细胞中过表达GFP或GFP-KLF5，再给予TNFα刺激，qRT-PCR和流式细胞术观察结果显示，过表达外源性KLF5可抑制TNFα诱导的SK-BR-3乳腺癌细胞凋亡。结论 TNFα可抑制SK-BR-3乳腺癌细胞中KLF5表达，KLF5参与了TNFα诱导的SK-BR-3乳腺癌细胞凋亡过程。
关键词： 乳腺肿瘤 肿瘤坏死因子α SK-BR-3乳腺癌细胞 Krüppel样因子5 凋亡 -
KLF5与NF-κB p50相互作用促进高糖诱导的血管平滑肌细胞炎症
目的 探讨锌指转录因子Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)在高糖诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)炎症中的作用及机制.方法 体外培养VSMCs,实时定量反转录聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测高糖对VSMCs炎症基因肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、KLF5和核因子κB p50(nuclear factorκB p50,NF-κB p50)表达的影响.用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)内源性敲低KLF5,Western blot检测VSMCs中TNF-α的表达.免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CoIP)检测VSMCs中高糖对KLF5和NF-κB p50相互作用的影响.结果 qRT-PCR和Western blot结果显示,在mRNA和蛋白质水平,高糖显著上调炎症基因TNF-α、KLF5和NF-κB p50的表达,呈剂量及时间依赖性(P<0.05).用siRNA内源性敲低KLF5后,高糖不能上调炎症基因TNF-α的表达.CoIP结果显示,高糖显著增强KLF5和NF-κB p50的相互作用.结论 KLF5通过与NF-κB p50相互作用促进高糖诱导的VSMCs炎症.
关键词： 血管平滑肌细胞 Krüppel样因子5 核因子κBp50 -
胃腺癌中Kruppel样因子4、5和增殖细胞核抗原表达
目的：应用免疫组化方法检测胃腺癌术后组织中Kruppel样因子（KLF）4、5和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达特征。方法51例经病理医师确诊的胃腺癌术后组织作为观察组，40例距肿物边缘＞5 cm的非肿瘤性胃黏膜组织作为对照组。两组KLF4、KLF5和 PCNA蛋白表达应用免疫组化检测。结果两组KLF4、KLF5和PCNA表达差别有显著性。观察组中KLF4、KLF5和PCNA的阳性率均与浸润深度相关，KLF4的阳性率与脉管内瘤栓相关，KLF5的阳性率与肿瘤的大径、脉管瘤栓相关，PCNA的阳性率与肿瘤的大径相关。线性相关分析显示观察组中 KLF5和PCNA具有正相关性，其他指标间未见明显相关性。结论胃腺癌术后组织中KLF4、KLF5和PCNA异常表达，三者异常表达对肿瘤性的进展过程起一定的作用。 KLF5可能对细胞增殖有影响。
关键词： 胃腺癌 Krüppel样因子4 Krüppel样因子5 增殖细胞核抗原 免疫组化
