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肥厚心室肌细胞单通道钙流的藤征
目的慢性压力负荷导致的心肌肥厚所伴有的动作电位时程的延长可能与L型钙流失活延迟有关. 本文的目的是探索左室高血压所致的家猫肥厚心肌的单通道L型钙流的特征,以及在动作电位延长中的作用.方法应用膜片钳技术研究正常和压力负荷所致的肥厚家猫心肌单通道L型钙流的特征.左室高血压模型用部分结扎降主动脉的方法.结果从-40?mV去极化到0?mV时,正常心肌和肥厚心肌的单通道L型钙流的振幅分别为1.02±0 .03?pA和1.05±0.03?pA,斜率电道分别为26.2±1.0?pS和25.8±0.9?pS,两者相比均无差别.但脉冲终末部分的平均振幅,肥厚心肌明显大于正常心肌.通道开放时间直方图分析表明,正常心肌细胞的开放时间分布呈单指数曲线,而肥大心肌细胞为双指数曲线 .肥大心肌的平均开放时间明显长于正常心肌细胞.结论左室压力负荷所致的肥大细胞的动作电位时程延长与L型钙流的失活时间延迟有关.
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硝苯地平对心室肌细胞L型钙通道状态依赖性阻滞的研究
目的探讨选择性L型钙通道阻滞剂硝苯地平对L型钙流[ICa(L)]浓度、状态依赖性阻滞作用的影响.方法采用膜片钳全细胞记录技术对豚鼠单个心室肌细胞,给予35℃的各种含药物细胞外液快速灌流,记录ICa(L).结果①保持电位-80 mV,硝苯地平抑制ICa(L)的IC50为0.3μmol·L-1;保持电位为-40 mV时,IC50为0.05μmol·L-1,呈浓度依赖性阻滞.硝苯地平0.3μmol·L-1作用于电压依赖的ICa(L)失活曲线,使其左移17 mV,至更负的膜电位,显示硝苯地平相对选择与失活态钙通道结合.②在10s的静息间隔药物作用时间后的第1个实验刺激,硝苯地平3μmol·L-1或30μmol·L-1加速ICa(L)的失活,提示硝苯地平对ICa(L)可能存在激活态阻滞.结论在生理条件下,硝苯地平对ICa(L)的阻滞呈浓度、状态依赖性.相对选择与失活态钙通道结合,且可能存在激活态阻滞.
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姜黄素对大鼠心室肌细胞快钠流和L型钙流的影响
目的:研究姜黄素对大鼠心室肌细胞快钠流(I Na)和L型钙流(ICa-L)的影响.方法:采用急性酶解分离法获得大鼠心室肌细胞,以全细胞膜片钳技术记录快钠流(I Na)和L型钙流(ICa-L),观察50μmol/L姜黄素对I Na和ICa-L的影响.结果:50μmol/L姜黄素对I Na和ICa-L的抑制率分别是71.9%± 6.3%(P＜0.01)和-1.7%±13.1%(P＞0.05).它使I Na电流密度-电压曲线上移,但不改变激活电位和反转电位,对ICa-L的电流密度-电压曲线无明显影响.结论:50μmol/L姜黄素对大鼠心室肌细胞INa 有较强抑制作用,对ICa-L无明显影响.
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硝苯地平阻断豚鼠心室肌细胞L型钙流特性的研究
选择性L型钙通道阻断剂硝苯地平(Nif)为常用的工具药,因此必须了解它对L型钙流(ICa(L))浓度、状态依赖性阻断,使用和非使用依赖性阻断等特性.以豚鼠分离的单个心室肌细胞为对象,采用膜片钳全细胞记录技术,给予35℃的各种含药物细胞外液快速灌流,记录ICa(L).结果:①保持电位-80 mV,使用含铯离子的细胞内、外液,在+10 mV的钳制电压,Nif抑制ICa(L)的IG5o为0.3 μmol@L-1;当保持电位为-40 mV时,IC50为0.05 μmol@L-1,显示Nif优先选择与失活态钙通道结合.②使用富含钾离子的细胞内、外液,对ICa(L)的非使用依赖性阻断,随Nif使用浓度(30～100 μmol@L-1)的增加和药物作用时间的延长而加强,同时对ICa(L)的使用依赖性阻断则减小.③在10 s的静息间隔药物作用时间后的第一个实验刺激,Nif 3μmol@L-1或30μmol@L-1加速ICa(L)的失活,提示Nif对ICa(L)可能存在激活态阻断.结论:在生理条件下,Nif对ICa(L)的阻断呈浓度、状态依赖性,对ICa(L)的非使用依赖性阻断随使用浓度的增加和作用时间的延长而加强,对ICa(L)的使用依赖性阻断则随之减弱.
