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圆柱瘤基因(CYLD)的增强表达介入Fas/FasL途径诱导人肺癌细胞株A549/H460坏死的研究
目的 探讨圆柱瘤基因(CYLD)在肺癌细胞株A549/H460的表达,及增强其表达对Fas/FasL途径诱导肺癌细胞死亡的影响,并探讨其可能的机制.方法 选取5例肺腺癌手术患者癌组织标本作为实验组,自身癌旁正常组织作为对照组,进行CYLD基因实时荧光PCR定量分析;肺癌细胞株A549/H460分别进行CYLD基因增强质粒转染,同样采取实时荧光定量PCR及统计学检验对转染效果进行分析;转染前后的A549/H460细胞株FasL膜蛋白刺激进行培养24 h,通过流式细胞分析细胞死亡情况.结果 5例癌组织和癌旁正常组织均有CYLD表达,且差异有统计学意义(P < 0.05),对照组为实验组的2.53倍;CYLD基因在A549细胞的表达较转染前高1.40倍,在H469细胞则比转染前高1.83倍;A549/H460细胞的坏死率较转染前增加,尤其是在提前加入zVAD-fmk后进行Fas信号诱导坏死率增加显著.结论 肺癌细胞CYLD基因的表达较正常肺组织下调,有效增强肺癌细胞株A549/H460的CYLD基因表达后,FasL膜蛋白可通过Fas信号诱导其显著坏死.
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去泛素化酶圆柱瘤蛋白研究进展
圆柱瘤基因(CYLD gene)是一种肿瘤抑制基因,其突变或者缺失可导致圆柱瘤、毛发上皮瘤、Brooke-Spiegler综合征等病变.目前其分子结构已经研究清楚,但其编码的去泛素化蛋白酶CYLD蛋白的功能却未完全清楚.CYLD蛋白是一种去泛素化酶.CYLD蛋白的N末端主要功能是参与微管微丝的运动与调节.其C末端主要功能却是通过去泛素化各种蛋白的泛素化链,抑制核因子κB(NF-κB)活化,从而调节细胞的生存与肿瘤的发生.同时发现,CYLD蛋白还参与调节肿瘤坏死因子、缺糖缺氧等诱导的凋亡.因此,概述CYLD蛋白的结构与功能可为脑缺血再灌注损伤提供新的治疗靶点.
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miR-130a-3p下调CYLD表达对乳腺癌MCF-7细胞功能的影响
目的：探讨miR-130a-3p对人乳腺癌MCF-7细胞功能的影响及其可能的靶向基因。方法：应用脂质体介导方法将miR-130a-3p模拟物（实验组）或对照模拟物（对照组）转染MCF-7细胞，分别采用MTT方法和细胞划痕实验检测细胞增殖和迁移能力变化，印迹法检测细胞中miR-130a-3p靶基因圆柱瘤基因（CYLD）的表达。结果：与对照组比较，实验组MCF-7细胞的增殖和迁移能力增强（P＜0.05），细胞中CYLD蛋白表达水平明显下调（P＜0.05）。结论：miR-130a-3p可能通过靶向调节CYLD蛋白表达增强人乳腺癌MCF-7细胞的增殖和迁移。
关键词： 乳腺肿瘤 圆柱瘤基因 MiR-130a-3p MCF-7细胞 -
CYLD 基因转染对人胰腺癌细胞株 PANC-1增殖及凋亡的影响
目的：观察CYLD基因转染对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖及凋亡的影响。方法采用脂质体法将重组真核细胞表达载体pcDNA3．0（－）／CYLD 转染PANC-1细胞，利用G418筛选带有pcDNA3．0（－）／CYLD的细胞。用Western blotting法检测PANC-1细胞中的CYLD蛋白，MTT法测定PANC-1细胞OD值，流式细胞仪检测凋亡PANC-1细胞并计算细胞凋亡率。结果与未转染及转染空载质粒的PANC-1细胞相比，转染pcDNA3．0（－）／CYLD的PANC-1细胞CYLD蛋白表达明显，其OD值降低、凋亡率升高（ P均＜0．05）。结论 CYLD基因转染可抑制人胰腺癌PANC-1细胞的增殖并诱导其凋亡。
