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RP-HPLC法测定益肺通络颗粒中岩白菜素的含量
目的 建立益肺通络颗粒有效成分岩白菜素的含量测定方法.方法 采用RP-HPLC法,Agillent高效液相色谱仪,Kromasil 0DS(250 min×4.6 mm,5μm)色谱柱;甲醇-水(20:80)为流动相;流速为1 mL/min;柱温为30℃;检测波长为275 nm;灵敏度为0.05 AUFS.进样量10μL.结果 在该方法中,岩白菜素进样量在0.054～0.540 μg范围内有良好的线性关系,r=0.999 06,平均回收率为98.53%,RSD为1.32%.结论 本方法准确简便,准确,重复性好,可用于益肺通络颗粒中有效成分岩白菜素的含量测定.
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苯酚-硫酸法测定益肺通络颗粒水提液总多糖含量
目的:建立益肺通络颗粒水提液总多糖的含量测定方法.方法:以葡萄糖为对照品,通过单因素试验,优选苯酚—硫酸法测定总多糖的佳显色条件.结果:佳显色条件为:加5％苯酚1.0mL,浓硫酸6.0mL,在100℃的条件下反应20min,冰水中冷却至室温.葡萄糖质量在16.6～124μg范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.999 1),平均回收率为100.6％,RSD为2.5％.结论:该法快速准确、稳定方便,可用于益肺通络颗粒工艺研究中总多糖的含量测定.
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益肺通络颗粒体外抗结核及止咳止血作用研究
目的 研究益肺通络颗粒体外抗结核、止血、止咳作用及对非特异免疫功能的影响,为其临床应用提供实验依据.方法 用人型结核分枝杆菌标准菌株(H37Rv)和临床分离的结核分枝杆菌敏感菌株和耐药菌株,接种于含有不同浓度益肺通络颗粒的培养基中,观察结核杆菌的生长情况;应用剪尾法、毛细管法测定小鼠的出血时间、凝血时间,观察益肺通络颗粒的止血作用;用氨水引咳,观察其止咳作用;通过巨噬细胞碳粒廓清试验,观察其对非特异性免疫功能(廓清指数和校正廓清指数)的影响.结果 益肺通络颗粒在高浓度(0.01~0.2 g/mL)时对结核分枝杆菌有显著的抑菌作用,但随着浓度降低,其抑菌效果也显著减弱,浓度减低至0.025 g/mL以下时抑菌作用不明显;与对照组小鼠出血时间(321.2±34.3)s、 凝血时间(135.8±5.1)s比较,益肺通络高剂量组小鼠出血时间(169.5±23.0)s、凝血时间(97.5±3.3)s均显著缩短(P<0.01);与对照组小鼠氨水引咳的潜伏期(36.4±1.9)s、5 min内小鼠的咳嗽次数(45.9±3.1)次比较,益肺通络高剂量组小鼠氨水引咳的潜伏期(54.1±1.4)s显著延长、5 min内小鼠的咳嗽次数(22.7±2.2)次显著减少(P<0.01);且小鼠廓清指数和校正廓清指数较对照组均有显著提高(P<0.01).结论 益肺通络颗粒具有体外抗结核作用,具有止血止咳和增强非特异性免疫功能的作用.
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益肺通络颗粒的主要药效学研究
目的 研究益肺通络颗粒抗结核、抑制超敏、增强免疫及止咳等方面的作用.方法 结核杆菌(H37RV)感染小鼠模型观察益肺通络颗粒的抗结核作用；2,4-二硝基氯苯(2,4-DNCB)对小鼠皮肤致敏和诱发,计算耳肿胀度；观察益肺通络颗粒的抗过敏作用,对小鼠炭粒廓清速率的影响,对小鼠氨水引咳试验的影响.结果 中、高剂量益肺通络颗粒对结核杆菌感染小鼠肺、肝、脾脏器均存在明显的保护作用(P＜0.01)；对小鼠耳肿胀度有较好的抑制作用；小鼠炭粒廓清指数和校正廓清指数均显著高于空白对照组(P＜0.01)；能明显延长小鼠氨水引咳的潜伏期,减少3 min内咳嗽次数.结论 益肺通络颗粒具有抗结核、抑制超敏、增强免疫及止咳的作用.
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益肺通络颗粒质量标准研究
目的 建立益肺通络颗粒的质量标准.方法 采用薄层色谱法对方中黄精、紫花地丁、百部进行定性鉴别；采用高效液相色谱法对矮地茶的主要成分岩白菜素进行含量测定.结果 在薄层色谱中可检出黄精、紫花地丁、百部的特征斑点,且斑点清晰,易于观察；岩白菜素进样量在0.054～0.54μg范围内与峰面积线形关系良好(r=0.99906),平均回收率为98.54％,RSD为1.31％(n=6).结论 所用方法简便、准确、重现性好,可作为该制剂的质量控制方法.
