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血管性假性血友病因子裂解酶的检测方法及临床应用的研究进展
血管性假性血友病因子裂解酶是存在于正常人血浆中的一种蛋白水解酶,其主要功能是将血浆中的大分子血管性假性血友病因子多聚体裂解成小分子片段,以调节血管性假性血友病因子连接血管下胶原和血小板并诱导血小板黏附和聚集的作用,从而防止微循环内血小板血栓形成.该酶活性的缺陷导致血浆中血管性假性血友病因子质与量发生改变,与血栓性血小板减少性紫癜、肿瘤等疾病的发生、发展有密切关系.因此,血管性假性血友病园子裂解酶的检测及临床应用的研究对于探索血栓性血小板减少性紫癜等疾病的诊断和治疗,具有重要的临床意义.
关键词： 血管性假性血友病因子裂解酶 活性检测 临床应用 -
血管性假性血友病因子裂解酶活性检测方法的建立及其临床应用
目的 建立一种检测血管性假性血友病因子裂解酶(vWF-cp)活性的方法,并探讨其临床应用.方法 用Sepharose CL-4B柱层析法从正常人新鲜冰冻血浆中分离出血管性假性血友病因子(vWF)作为酶反应底物.然后联合应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印记与发光绘图法(SWL法),分别检测60名健康成人、28名脑梗塞和7名血栓性血小板减少性紫癜(TTP)患者的血浆vWF-cp活性,并比较各组的检测结果.结果 该法准确检测了60名健康成人和35名患者的血浆vWF-cp活性,批内和批间变异为4.81%和8.63%.60名健康成人vWF-cp活性为(86.53±17.49)%;脑梗塞vWF-cp活性为(77.15±16.72)%,其活性低于健康成人(P＜0.05);7例TTP,血浆置换前vWF-cp活性为(9.06±7.17)%,其活性显著低于健康成人(P＜0.01);血浆置换24 h后vWF-cp活性为(47.00±6.27)%,其活性有所升高,但仍低于健康成人(P＜0.01);恢复期vWF-cp活性为(83.18±8.83)%,其活性接近健康成人(P＞0.05).结论 SWL法可准确检测健康成人和疾病患者的血浆vWF-cp活性,其敏感性、特异性和重复性较好,可应用于临床检验.与健康成人相比,脑梗塞患者vWF-cp活性降低;TTP患者vWF-cp活性显著降低,血浆置换能有效提高TTP患者vWF-cp活性水平.
关键词： 血管性假性血友病因子裂解酶 检测方法 脑梗塞 血栓性血小板减少性紫癜
