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紫草素对卵巢癌 A2780细胞的凋亡诱导作用及机制的研究
目的：探讨紫草素对卵巢癌 a2780细胞的凋亡诱导作用及机制。方法应用细胞培养，活细胞计数,Mtt 法检测不同浓度紫草素对卵巢上皮癌细胞 a2780的增殖抑制作用。倒置相差显微镜下观察不同浓度紫草素对 a2780细胞的大体形态学影响。结果紫草素在体外具有抑制卵巢癌细胞 a2780增殖的作用。透射电镜观察到紫草素处理的细胞产生明显的凋亡小体。紫草素作用后的细胞生长缓慢。结论紫草素对于采用细胞培养方法产生的卵巢癌细胞 a2780具有显著的抑制细胞增值和诱导细胞凋亡作用。
关键词： 紫草素 卵巢癌a2780细胞 凋亡 凝胶电泳 免疫组织化学 -
OSTP增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用
目的 研究卵巢癌特异性结合肽(OSTP)及联合紫杉醇对卵巢癌A2780细胞生长及凋亡的影响.方法 体外培养卵巢癌A2780细胞,随机分为4组:溶剂对照组(1640和0.1％ DMSO组)、OSTP组、紫杉醇组、OSTP联合紫杉醇组.采用四甲基偶氮唑盐(MTT法)检测OSTP对A2780细胞生长的影响;用Annexin-V-FITC和PI双染法标记A2780细胞,通过流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 MTT法检测OSTP以不同浓度作用于卵巢癌A2780细胞时,可对该细胞的生长起到抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).应用流式细胞技术检测细胞凋亡发现:不同浓度的OSTP(20、40、80、160、320μmol/L)对A2780细胞的凋亡率分别7.88％、8.348％、8.727％、9.393％和10.68％,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01),提示OSTP可诱导细胞凋亡.OSTP和紫杉醇联合应用,在不同的预处理组(加OSTP80μ mol/L 0、3、6、12h)后再加紫杉醇10μmol/L作用48h,结果发现细胞凋亡率分别是39.40％、53.09％、48.18％和45.62％,均高于OSTP和紫杉醇单独用药及两者的凋亡率相加值,且差异有统计学意义(P ＜0.001).提示OSTP能增强紫杉醇诱导的卵巢癌A2780细胞凋亡作用.结论 OSTP对卵巢癌A2780细胞有生长抑制及凋亡作用,尤其是OSTP能增强紫杉醇诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用,对于探讨和开发OSTP作为靶向化疗增敏剂治疗卵巢癌有良好的应用前景.
关键词： 卵巢癌a2780细胞 OSTP 紫杉醇 细胞凋亡 -
OSTP-DDP靶向抑制卵巢癌A2780细胞生长作用的研究
目的研究卵巢癌特异性结合肽( ovarian cancer spe-cific targeting peptide, OSTP)与顺铂( cis-dichlorodiamineplati-num, DDP)偶联物( OSTP-DDP)对卵巢癌A2780细胞的靶向抑制作用。方法化学合成 OSTP-DDP,体外培养卵巢癌A2780细胞,采用CCK-8法分别检测 OSTP-DDP和 DDP对卵巢癌A2780细胞的生长抑制作用；通过Annexin V-FITC凋亡试剂盒分别检测OSTP-DDP和DDP对卵巢癌A2780细胞的周期和凋亡作用。结果通过质谱分析和高效液相色谱( HPLC)分析,提示成功合成 OSTP-DDP。 CCK-8法检测显示,OSTP-DDP与DDP分别以不同浓度(10、20、40、80、160、320μmol·L-1)处理卵巢癌A2780细胞24、48、72 h后,均可对该细胞的生长起到抑制作用,且呈时间、浓度依赖性。且OSTP-DDP的作用强于DDP ( P<0．05),提示OSTP-DDP具有靶向抑制细胞生长作用。流式细胞术检测结果显示,经OSTP-DDP和DDP处理后,细胞周期均被阻滞于G1期,作用72 h后,OSTP-DDP对卵巢癌A2780细胞的周期抑制作用强于DDP,差异具有统计学意义(P<0．05)。作用24、48、72 h后,OSTP-DDP对卵巢癌A2780细胞凋亡的作用强于DDP( P<0．01),差异具有统计学意义,提示OSTP-DDP具有较强的靶向诱导细胞凋亡作用。结论 OSTP-DDP对卵巢癌A2780细胞的生长具有靶向抑制作用,OSTP作为化疗药物靶向载体治疗卵巢癌有良好的应用前景。
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卵巢癌特异性结合肽OSTP的鉴定
目的 验证卵巢癌特异性结合肽(OSTP)对卵巢癌A2780细胞的特异性结合作用. 方法 合成OSTP并标记荧光素5-FAM.将培养的卵巢癌A2780细胞及对照组胃癌SGC7901细胞、骨肉瘤MG63细胞分别加5-FAM-OSTP孵育,荧光显微镜下观察拍照.构建卵巢癌A2780细胞荷瘤小鼠模型,尾静脉注入5-FAM-OSTP,循环1h后进行左心室灌注,取肿瘤组织及各脏器组织,行冰冻切片,荧光显微镜下观察拍照. 结果 成功合成和标记5-FAM-OSTP.荧光显微镜观察显示:5-FAM-OSTP孵育后的卵巢癌A2780细胞产生明亮的黄绿色荧光,而对照组SGC7901、MG63细胞不产生荧光.裸鼠体内实验结果显示:肿瘤组织可见强荧光信号,平均荧光强度为17.656±1.980；肝组织平均荧光强度4.277±0.291；肾组织平均荧光强度4.422±0.767;其他脏器均无可见荧光信号.肿瘤组织与肝、肾组织的荧光强度间差异有显著性(P＜0.05). 结论 通过体内外实验证实了5-FAM-OSTP对卵巢癌A2780细胞具有特异结合作用,有望成为卵巢癌靶向化疗药物的导向肽.
关键词： 5-FAM-OSTP导向肽 卵巢癌a2780细胞 靶向作用
