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不同浓度谷氨酸对海马神经元损伤及异丙酚的保护机制
目的 观察不同浓度谷氨酸对海马神经元的损伤及异丙酚对损伤的拮抗作用.方法 培养12d的海马神经元细胞,随机分为4组:正常对照组(Control组)与含谷氨酸10μmol/L组(G10组)、50μmol/L组(G50组)及100μmol/L组(G100组).再加入异丙酚500μmol/L再培养24h组(PG10、PG50、PG100组).MTT法测定细胞存活率及免疫组化测定c-fos蛋白阳性面积率.结果 与正常对照组相比,谷氨酸各组和异丙酚PG100组的细胞存活率下降(P＜0.05),谷氨酸各组有剂量依赖性;与对应谷氨酸各组相比,异丙酚各组的细胞存活率上升(P＜0.05).位于胞核内的c-fos阳性蛋白在谷氨酸各组呈紫黑色且数量呈剂量依赖性增加(P＜0.01),与对应谷氨酸各组相比,异丙酚各组能降低c-fos蛋白阳性面积率.结论 外源性谷氨酸对海马神经元有呈剂量正相关的损伤作用,异丙酚能降低此损伤,减少c-fos蛋白过度表达,提高海马神经元的存活率.
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大蒜素对尼古丁致人牙周膜成纤维细胞氧化毒性的保护作用
目的 研究大蒜素对尼古丁所致人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs)氧化毒性的保护作用.方法 1)建立尼古丁对HPDLCs氧化毒性的模型,采用水溶性四氮唑(WST)比色法选出可有效抑制HPDLCs存活率的尼古丁质量浓度X,用于后续实验.2)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组(大蒜素质量浓度分别为15、30、60μg·mL<'-1>),以不同培养液培养24 h后,采用WST比色法选出可显著改善HPDLCs存活率的大蒜素质量浓度Y用于后续实验.3)将体外培养的第5代HPDLCs分为空白组、尼古丁组、尼古丁+大蒜素组,分别于培养1、4、8、12、24 h后测量细胞内谷胱甘肽(GSH)浓度.结果 0.8 mg·mL<'-1>尼古丁即可显著抑制HPDLCs存活率(细胞存活率为空白组的77%,P<0.05,取X为0.8 mg·mL<'-1>):而60 μg·mL<'-1>大蒜素可显著改善此负性作用,将细胞存活率提升至尼古丁组的112%(P<0.05),且与空白组比较无统计学差异(P>0.05),取Y为60μg·mL<'-1>.在培养后的各时间点,尼古丁+大蒜素组GSH浓度与空白组相比均无统计学差异(P>0.05),但较尼古丁组均有明显提高(P<0.05):培养8 h时,尼古丁+大蒜素组GSH浓度与尼古丁组相比差异大,前者较后者提高82%.结论 60 μg·mL<'-1>大蒜素可以显著降低尼古丁对HPDLCs的氧化损伤作用.
