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  • 基因编码钙指示剂在药物反应性细胞核钙信号实时动态检测中的应用

    作者:龚明涛;张晨光;丁卫

    目的 探讨新型基因编码钙指示剂(genetically-encoded calcium indicators, GeCIs)在药物反应性细胞核钙信号实时动态检测中的应用.方法 将常用的GeCI变体--GCaMP6s用核定位序列(nuclear localization sequence,NLS)标记以用于细胞核钙的检测;同时在其C端与红色荧光蛋白tdTomato融合作为分子内的定量参照.将构建的质粒分别转染至HeLa细胞和U87MG细胞中,利用活细胞共聚焦显微成像技术对核钙信号的实时变化进行动态监测.结果 蕈青霉素(Paxilline)能够引起在40 min连续记录中核钙水平的持续增加,并且增加的动力学模式在不同的细胞系中差异存在统计学意义;同时在药物处理后细胞反应的筛选中显示,青蒿素可以引起细胞核钙浓度的明显改变,其变化的幅度与持续情况与蕈青霉素及过氧化氢的作用有所不同.此外,笔者还发现利用核钙的变化指标可以对细胞在接受应激性刺激后的异质性表现进行统计聚类分析.结论 在非兴奋细胞中,不同药物刺激可以引起细胞核钙离子浓度的升高.

  • 心肌细胞的核质网

    作者:常惠;余志斌

    核内外膜、核孔复合体、核膜整合蛋白与核膜下紧密连接的核纤层蛋白,在细胞核内形成网状的核质网(nucleoplasmic reticulum,NR).NR作为独立的功能单元,其不仅是包裹核质的膜结构,以维持核内环境的相对稳定性,而且还具有其他多种重要功能.本文就NR的结构、功能及其在心肌系统中发挥的作用作一简要综述.

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