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失血性休克大鼠小肠上皮细胞线粒体ATPase8亚基表达的变化
目的 探讨正常与休克大鼠小肠上皮细胞线粒体DN A(mitochondria DNA,mtDNA)ATPase8亚基及其表达的变化,为休克的防治提供理论基础.方法 用透射电镜观察大鼠小肠上皮细胞线粒体形态学变化,用基因重组、测序,通过gene Bank与mtDNA已知序列进行比较,研究大鼠小肠上皮细胞mtDNA ATPase8基因的改变.用RT-PCR观察大鼠小肠上皮细胞线粒体ATPase8 mRNA的表达.结果 休克组大鼠小肠上皮细胞线粒体数密度和面密度与对照组相比有显著差异(P＜0.05或P＜0.01).正常组小肠上皮细胞mtDNA ATPase8亚基9个DNA测序有2处突变(A7868G,空7767-7768G).休克组有3处突变,即A7797空,T7772C、T7863C.失血性休克组大鼠上皮细胞线粒体ATPase8 mRNA表达比正常组显著性下降(P＜0.05),为对照组的27.3%.结论 休克大鼠小肠上皮细胞mtDNA ATPase8基因突变以及表达水平下降是导致ATPase8亚基改变的重要原因.
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长爪沙鼠ATPase8,ATPase6,COX3基因的克隆及序列分析
目的 对长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析.方法 根据长爪沙鼠已知基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对目的片段进行测序鉴定.结合已公布啮齿类动物ATPase8,ATPase6,COX3基因序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于小进化法和UPGMA法构建系统进化树.结果 获得长爪沙鼠线粒体ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列,其与家鼠、小家鼠和仓鼠均具有较高的同源性(76～98%);进化分析结果显示,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠遗传距离较近;碱基G的含量分别为6.9%,10.7%,15.2%,符合mtDNA的特点;A+T含量分别为68.2%,64.1%,59.2%,明显低于G+C含量,符合哺乳动物的特点.结论 本研究为首次获得长爪沙鼠ATPase8,ATPase6,COX3基因全序列,长爪沙鼠与家鼠、黑家鼠和仓鼠具有较近遗传距离,本研究为长爪沙鼠进化研究、线粒体的结构和功能研究奠定基础.
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葱白提取物对非酒精性脂肪肝模型大鼠ATPase6、ATPase8表达的影响
[目的]观察葱白提取物对非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型大鼠ATP合酶Fo亚基6(ATPase6)、ATP合酶Fo亚基8(ATPase8)表达的影响,并探讨其作用机制.[方法]将50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葱白低剂量组、葱白中剂量组、葱白高剂量组,每组10只.采用高脂饮食喂养复制NAFLD模型大鼠,造模10周后,给予葱白提取物连续干预4周后,测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)的含量;苏木精-伊红(HE)染色法观察肝脏组织结构变化;Real time PCR检测大鼠肝脏组织中ATPase6、ATPase8 mRNA的表达.[结果]与正常组比较,模型组出现明显肝脂肪变性,血清ALT、AST、TC、TG水平明显升高(P<0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA的表达明显降低(P<0.05);相较于模型组,葱白低、中、高剂量组肝脂肪变性均不同程度减轻;血清ALT、AST、TC、TG水平均不同程度降低(P<0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA表达不同程度升高(P<0.05).与葱白低剂量组比较,葱白中、高剂量组肝脂肪变性减轻明显,ALT、AST、TC、TG水平明显降低(P<0.05),ATPase6、ATPase8 mRNA水平明显升高(P<0.05),中、高剂量葱白组之间差异无统计学意义.[结论]葱白提取物能够改善肝脂肪变性,可能与提高ATPase6、ATPase8的表达,增加肝线粒体ATP合成有关.
