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重组胶质细胞源性神经营养因子腺病毒保护培养的原代脊髓运动神经元
目的:观察胶质细胞源性神经营养因子(glia cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)重组腺病毒(AdCMVgdnf)对培养的原代脊髓运动神经元的保护作用.方法:原代培养的脊髓运动神经元转染不同滴度AdCMVgdnf不同时间后计数,并计算凋亡的运动神经元的百分率.结果:104～107 pfu*ml-1 (pfu,plaque form unit) AdCMVgdnf的保护作用中, 以107 pfu*ml-1作用显著,腺病毒的滴度过大或过小,保护作用都减弱;观察1～9 d不同转染时间的效果时,在第3～9天均可观察到保护作用,以第9天明显,存活的运动神经元数比对照组增多280%,同时凋亡神经元的百分比较对照组减少12.9%.结论:在一定的时间(9天)和合适的腺病毒滴度(107 pfu*ml-1)条件下,腺病毒介导的GDNF对体外培养的脊髓运动神经元起到了保护作用.
关键词： 脊髓 运动神经元/药物作用 腺病毒 人 胶质细胞源性神经营养因子 -
施万细胞分泌物对面神经运动神经元营养活性的实验研究
目的：比较培养的面神经和坐骨神经来源施万细胞（Schwann cell, SC）的可溶性分泌物对面神经运动神经元（facial motoneuron, FMN）的营养活性作用。方法：收集1～4代大鼠沃勒变性段和乳鼠面神经及坐骨神经SC体外无血清条件培养液，超滤浓缩，测定分离纯化的FMN细胞在含不同来源的SC分泌的可溶性物质的条件培养液中的生长活性。结果：在含4种SC条件培养浓缩液（concentrated conditioned media， SC-CMC）的培养液中，FMN生长活性均明显高于在含血清或无血清培养液中，不同来源的SC-CMC间差异无显著性（P>0.05）；其活性主要来自相对分子质量大于30 000组份的蛋白多肽物质，FMN的活性在高蛋白浓度时明显高于低蛋白浓度组（P<0.01）。结论：面神经和坐骨神经SC-CMC中含有促FMN存活、生长的蛋白或多肽，相对分子质量大于30 000，其活性作用与使用的蛋白浓度有关；在研究SC分泌物对FMN营养活性作用时，可考虑选择坐骨神经SC。
关键词： 施万细胞 面神经/药物作用 运动神经元/药物作用 营养评价 -
GDNF重组腺病毒对损伤运动神经元的保护作用
目的:观察携带胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)基因的重组腺病毒(AdCMVgdnf)对损伤运动神经元的保护作用.方法:采用培养运动神经元的谷氨酸损伤模型,评价GDNF重组腺病毒对损伤运动神经元的影响,指标是运动神经元计数.结果:(1)建立了运动神经元谷氨酸损伤模型:当培养液中加入0.5mmol.L-1的谷氨酸,作用24～48h后,运动神经元数目较对照组显著减少(P＜0.01);(2)携带GDNF基因的重组腺病毒可显著减轻谷氨酸导致的运动神经元损伤.结论:腺病毒介导的GDNF表达对损伤的运动神经元具有保护作用.
关键词： 运动神经元/药物作用 腺病毒 胶质细胞源性神经营养因子
