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重组抗埃博拉病毒单克隆抗体质控方法的建立
目的 重组抗埃博拉病毒抗体是由3种抗埃博拉病毒包膜糖蛋白(GP)的单抗组成的复方抗体,本实验分别对3种重组单抗的质控方法进行研究.方法 利用ELISA方法测定重组抗埃博拉病毒单抗的结合活性;利用LC-MS肽图法对其进行鉴别;CE-SDS和SE-HPLC测定纯度;iCIEF法测定等电点及电荷异质性;切糖后对N-糖进行2AB标记,用正向色谱结合质谱对其糖型和含岩藻糖修饰糖型比例分析;利用高效液相色谱法测定其聚山梨酯20含量.结果 3种重组抗埃博拉病毒单抗结合活性的EC50为(12.53±1.62)、(11.10±0.62)、(6.09±0.35) ng· mL-1;LC-MS肽图法测定一级序列覆盖率均大于95％;非还原CE-SDS主峰纯度分别为(94.41±0.05)％、(95.58±0.17)％、(96.11±0.05)％;还原CE-SDS重链和轻链纯度之和分别为(98.19±0.06)％、(97.97±0.03)％、(98.57±0.03)％;SE-HPLC主峰分别为(99.59±0.01)％、(99.56±0.01)％、(99.74±0.01)％;iCIEF分析主峰等电点为(8.70±0.01)、(8.26±0.01)、(8.85±0.01);3种单抗聚山梨酯20含量分别为(0.34±0.00)、(0.35±0.00)、(0.35±0.01) mg·mL-;LC-MS对N糖谱分析相对灵敏,3种单抗含岩藻糖糖型比例均小于0.5％.结论 本实验的质控方法研究运用了现代化质控理念,建立的质控方法具有保证产品安全、有效、质量可控的特点,为突发状况下埃博拉疫情防控提供了用药储备的技术支持,也为其他组合抗体的质量控制积累了经验.
关键词： 重组抗埃博拉病毒单克隆抗体 质量控制 肽图法 -
阿胶质量评价研究进展
阿胶作为我国传统的补益药,近年来需求剧增,其质量问题长期受到关注.阿胶主要原料驴皮与近缘动物皮成分相似,缺乏专属性鉴别成分,鉴别难度大,阿胶的质量评价研究长期以来都是难点和热点.本文综述了近年来阿胶的质量评价方法,认为肽图法、 分子鉴定法是目前比较有效的鉴别方法,而现有定量分析方法仍有较大缺陷,基于此,下一步应进一步挖掘阿胶质量标志物特别是多肽进行定量分析,并结合药效进行有效性评价,同时做好阿胶各个生产环节的质量监控和标准化,进一步完善阿胶质量评价方法.
