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白藜芦醇对PPAR-γ激动作用的研究
目的探讨白藜芦醇是否为过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ)的激动剂.方法在自身不表达PPAR-γ蛋白的U937细胞中电穿孔共转染PPARγ表达质粒和其报告质粒,从而构建PPAR-γ激动剂筛选模型.同时在U937细胞内单独转染PPAR-γ报告质粒作为阴性对照.转染细胞中加入已知PPAR-γ的激动剂吡格列酮30 μmol·L-1和15,30μmol·L-1的白藜芦醇,培养24h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPAR-γ的能力.结果共转染细胞中加入吡格列酮后显著激动了PPAR-γ,使虫荧光素酶活性增强了4.2倍(P＜0.001),验证了筛选模型的有效性.而加入15和30μmol·L-1白藜芦醇后,虫荧光素酶活性也分别提高1.78(P=0.033)和2.47倍(P=0.01)且与剂量相关(P=0.04).而单独转染报告质粒的U937细胞加入上述药物后,虫荧光素酶活性无显著差异.结论白藜芦醇能够剂量依赖的激动PPAR-γ.
关键词： 白藜芦醇 过氧化物酶增殖剂激活受体γ 激动剂 动脉粥样硬化 炎症 -
沙棘提取物对猪脂肪中部分脂肪代谢相关基因表达的影响
目的 研究早期断奶仔猪喂饲沙棘提取物对脂肪组织中部分脂肪代谢相关基因表达的影响及其机制.方法 选用(28±2)日龄东北民猪16头,随机分为对照组和试验组.试验组仔猪饲料中添加沙棘提取物(1000 mg/kg),喂饲28d后改成基础饲粮,D180屠宰取样,RT-PCR方法检测猪脂肪组织中过氧化物酶增殖剂激活受体α(PPARα)、γ(PPARγ)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)和脂肪酸合成酶(FAS)的基因表达.结果 早期喂饲沙棘提取物可使(1)腹脂和皮脂中PPARα和ACO的mRNA表达均增加;(2)腹脂中PPAγ mRNA表达降低,腹脂和皮脂中FAS mRNA表达均降低.结论 断奶仔猪早期喂饲沙棘提取物可在转录水平调控脂肪代谢相关基因的表达,这可能是减少猪体内脂肪沉积和改善猪肉品质的机制之一.
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PPARγ激动剂筛选模型的建立及其应用
目的建立一种简便实用的细胞模型,用于筛选过氧化物酶增殖剂激活受体γ(PPARγ)的新配体激动剂.方法在U937细胞中,共转染PPARγ表达和报告质粒,构建PPARγ激动剂筛选模型,单独转染PPARγ报告质粒作为阴性对照.转染细胞中加入候选药物,24 h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPARγ的能力. 结果已知的PPARγ配体激动剂吡格列酮使虫荧光素酶活性增强了4.48倍(P<0.001),验证了模型的有效性.高密度脂蛋白(HDL)不能激动PPARγ,而氧化后随剂量增加,使虫荧光素酶活性增强1.33倍(25 μg/mL)和1.78倍(50 μg/mL),但没有达到统计学差异(P=0.058,P=0.054);白藜芦醇使虫荧光素酶强度增加了1.78倍和2.47倍(P=0.033, P=0.01).结论通过细胞共转染PPARγ表达质粒和编码虫荧光素酶的报告质粒,可以建立简便的PPARγ激动剂筛选模型.HDL氧化后可能会产生激动PPARγ的成份,而白藜芦醇具有较强的PPARγ激动能力.
关键词： 过氧化物酶增殖剂激活受体γ 白藜芦醇 激动剂
