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低剂量乙烷硒啉对HepG2细胞亚株的影响不同
作为一种合成的、有抗肿瘤活性的有机硒,乙烷硒啉可通过抑制硫氧还蛋白还原酶,导致其生物学底物硫氧还蛋白处于氧化状态,随后升高的细胞内活性氧引发细胞周期阻滞或触发凋亡.乙烷硒啉的低剂量作用尚未被研究.本研究中乙烷硒啉低剂量(1 μM)定义为保持90％以上细胞存活的浓度.从单个HepG2细胞增殖而来的亚株(SM01,SM02,SM03)被用于低剂量乙烷硒啉效应检测.考察了低剂量乙烷硒啉对HepG2及其亚株的细胞周期转变、蛋白表达、集落形成、细胞球生长变化的影响.HepG2及其亚株对致死剂量的CDDP和5-FU显示了不同的敏感性.低剂量乙烷硒啉处理12h后S期比例升高,可在随后的12h内部分恢复,其细胞内蛋白p53,NF-κB等尚未完全恢复.低剂量乙烷硒啉未抑制较小的细胞集落(直径＞100 μm)形成,未影响HepG2和SM01的细胞球生长.低剂量乙烷硒啉可显著抑制SM03绌胞存活、较大细胞集落(直径＞500 μm)形成和细胞球生长,尽管SM03细胞蛋白水平恢复较快.总体上,HepG2及其亚株对与化学物和低剂量乙烷硒啉的反应不同,低剂量乙烷硒啉可抑制HepG2亚株(SM03)的存活和生长.
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不同转移特性稳定表达绿色荧光蛋白的乳腺癌MCF7细胞亚株的建立
目的 建立不同转移特性并稳定表达绿色荧光蛋白的人乳腺癌MCF7细胞亚株.方法 转染绿色荧光蛋白(GFP)入MCF7细胞,通过有限稀释法得到10株亚株,细胞电泳得到电泳率高(A2)、低(C6)的两株,测定其增殖率、克隆形成率、体外侵袭能力,行裸鼠皮下、原位成瘤试验.结果 获得稳定表达绿色荧光蛋白不同转移特性的细胞亚株A2和C6,A2的群体倍增时间为25.6 h,C6为41.8 h;软琼脂形成率A2为30.7%,C6为14%;体外侵袭能力,A2的平均侵袭细胞数为(136.80±12.36)个,明显高于C6(73.62±9.76)个;裸小鼠皮下成瘤试验发现A2成瘤力强,并且A2原位接种后可出现骨转移.结论 建立的细胞亚株有不同转移特性,有助于进一步研究乳腺癌骨转移的分子机制和治疗.
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鼻咽癌细胞亚株不同成瘤与转移潜能的分子机制
背景与目的:我们已从鼻咽癌细胞株SUNE-1的克隆株中筛选出3个具有不同生物学特性的细胞亚株:5-8F(高成瘤、高转移)、6-10B(成瘤、不转移)和13-9B(不成瘤);在本研究中,我们从病毒和遗传两方面探讨鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株的生物学特性差异的分子机制.方法:①PCR检测亚株中EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)的BamHIW片段;②应用原位杂交技术检测SUNE-1及其3个亚株中EBV潜伏膜蛋白1(latent membrane protein1,LMP1)的表达状况;③应用比较基因组杂交(comparative genomic hybridization,CGH)检测SUNE-1及其3个亚株的基因扩增情况.结果:①在SUNE-1及其3个亚株中存在EBVBamHIW片段;②在3个亚株中,都能够检测到EBV-LMP1的表达,且表达强度一致.③CGH检测发现:SUNE-1的DNA拷贝数变呈现以1、2p、3、4、5p、6、7、9、10q、11、12q、13q、17q和18q增加和22q拷贝数减少为主;5-8F染色体变化以3p、7q、8q、9q、和10q拷贝数增加为主;而6-10B和13-9B除少数几个染色体区域发生缺失外,均无DNA拷贝数的增加.结论:鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株,均有EBV的表达和存在不同的染色体变化,提示其生物学特性的差异可能主要由于染色体的变化引起,但EBV的感染对维持鼻咽癌的恶性程度可能起着重要的作用.
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鼻咽癌细胞肝转移亚株的建立
目的建立鼻咽癌细胞肝转移亚株,研究鼻咽癌肝转移机制.方法利用裸鼠体内传代的方法获得肝转移细胞亚株,并用体内和体外实验来观察其侵袭转移能力.结果经体内反复筛选得到肝转移能力高的亚株5-8F-H3B-EGFP,其侵袭性、运动性以及形成肝转移灶的能力均大于母系5-8F-EGFP,并具有较高的肝脏亲和性.结论该亚株的建立为今后研究鼻咽癌肝转移的分子机制奠定了基础.
