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改良碳青霉烯灭活试验在检测肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶中的应用评价
目的 评估改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)和EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)在中国产碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CPKP)中的应用价值.方法 分别用mCIM和eCIM筛查中国271株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)中产酶阳性菌株,并以碳青霉烯酶基因聚合酶链反应(PCR)及测序结果为标准计算灵敏度和特异度.结果 271株非重复CRKP菌株中碳青霉烯酶基因阳性菌有209株,未检测出耐药基因的菌株有62株.mCIM检测到209株基因阳性菌株中208株为阳性菌株,62株基因阴性菌均为阴性;eCIM检测出的阳性菌株有58株,阴性菌株有150株.mCIM检测敏感度为99.5％,特异度为100.0％;eCIM检测敏感度为100.0％,特异度为99.3％.其中有1株产IMP-4型碳青霉烯酶菌株的mCIM结果为阴性,1株产KPC-2型碳青霉烯酶菌株的mCIM和eCIM都为阳性.结论 mCIM和eCIM在肺炎克雷伯菌中检测碳青霉烯酶有很好的敏感度和特异度,值得推广使用.
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MHT和mCIM试验检测肠杆菌科金属碳青霉烯酶效能的评价
目的 探讨改良Hodge试验(MHT)及改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)检测肠杆菌科细菌金属碳青霉烯酶的应用价值.方法 VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定及药敏系统进行细菌鉴定和药敏试验,筛选2015-2017年非重复临床分离的碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌,MHT及mCIM进行产碳青霉烯酶表型确证试验,PCR检测常见的金属碳青霉烯酶IMP-4、IMP-8、VIM-1、VIM-2、NDM基因.比较MHT及mCIM对肠杆菌科金属碳青霉烯酶的检测效能.结果 本实验共收集40株临床分离菌株,MHT阳性36株,阳性率90.0％.mCIM阳性39株,阳性率为97.5％.PCR产物测序Blast比对证实4株为产IMP酶菌株,5株产NDM型菌株,未检测到VIM基因.MHT试验检测IMP酶的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为100.0％、11.1％、11.1％、100.0％,MHT检测NDM酶分别为40.0％、2.9％、5.6％、25.0％.mCIM检测IMP酶的灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别100.0％、2.8％、10.3％、100.0％,mCIM检测NDM型分别为100.0％、2.9％、12.8％、100.0％.结论 MHT及mCIM检测肠杆菌科细菌产金属碳青霉烯酶具有良好的灵敏度,但特异性偏低,应结合分子生物学方法进行检测,为感染控制提供保障.
关键词： 碳青霉烯酶 改良Hodge试验 改良碳青霉烯灭活试验 金属碳青霉烯酶 -
肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶的检测及基因型分析
目的 分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药情况,检测常见的碳青霉烯酶的发生情况及基因型别,为临床治疗该类菌提供依据.方法 采用VITEK-2型全自动微生物检测系统进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验(MHT)、Carba NP试验和改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)对碳青霉烯酶进行表型检测,EDTA协同试验检测金属酶;并采用聚合酶链反应(PCR)方法检测KPC碳青霉烯酶耐药基因,以及ERIC-PCR对耐药株的同源性分析.结果 药敏试验显示25株CRKP仅对复方新诺明和米诺环素敏感率较高;MHT试验、Carba NP试验和mCIM试验结果一致,24株(96％) CRKP产碳青酶烯酶,1株CRKP未检出碳青霉烯酶,协同试验未检测出B类碳青霉烯酶(金属酶);25株CRKP中有23株检测出blaKPC-2基因;ERIC-PCR分型可分为8型,其中Ⅱ型为主要的流行株,共14株,Ⅰ型3株,Ⅲ型和Ⅶ型各2株,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ型各1株.结论 CRKP多药耐药情况严重,其碳青霉烯酶以产KPC-2型为主;改良Hodge试验、Carba NP试验和mCIM试验结果与PCR法有高度的一致性,且快速、简单,为临床提供了可靠的筛选方法.
