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  • 中日产川芎的matK、ITS基因序列及其物种间的亲缘关系

    作者:刘玉萍;曹晖;韩桂茹;伏见裕利;小松かつ子

    目的分析中国产川芎Ligusticum chuanxiong Hort.及日本产川芎Cnidium officinale Makino的核基因组ITS和叶绿体基因组matK序列,为探讨中日产川芎物种间的亲缘关系提供分子依据.方法采用PCR直接测序技术测定川芎和日本川芎的ITS基因和matK基因核苷酸序列并作序列变异分析.结果川芎和日本川芎的matK序列长度均为1268 bp,编码422个氨基酸.ITS1-5.8S-ITS2序列长度均为699 bp,其中18S rRNA基因3′端序列54 bp,ITS1序列215 bp,5.8S rRNA基因序列162 bp,ITS2序列222 bp,26S rRNA基因5′端序列46 bp.根据排序比较,川芎原植物与其商品药材间的matK基因和ITS基因序列完全相同,而川芎与日本川芎间matK基因则仅有1个变异位点,即在上游959 nt处1个转换替代(T→C),反映在氨基酸序列则发生一个非同义取代V(GTG)→A(GCG);ITS基因也仅有1个变异位点,即在ITS1上游54 nt处1个转换替代(T→C).结论通过进化速率较快的基因序列同源性分析,基本可以认为中日所产川芎基原一致,日本川芎学名似应改为Ligusticum chuanxiong Hort..

  • 中国川芎和日本川芎总生物碱含量测定及质量评价

    作者:姚艺新;洪远林;华芳;金玉青;梁爽;陈志敏;吕光华

    目的:以活性成分总生物碱的含量为指标,评价中国川芎和日本川芎的质量.方法:通过优化总生物碱的提取方法、酸性染料条件和检测波长,建立酸性染料比色法测定川芎总生物碱含量的方法;并从不同产地收集、测定了16份中国川芎和8份日本川芎样品中总生物碱的含量.结果:中国川芎总生物碱的含量(0.511%,n=16)比日本川芎(0.331%,n=8)高54.4%,差异具有统计学意义(P<0.05).其中,中国川芎根茎药材(0.524%,n=13)比日本川芎根茎药材(0.372%,n=6)高40.9%;中国川芎饮片(0.454%,n=3)比日本川芎饮片(0.211%,n=2)高115.2%.从四川彭州采集的中国川芎药材中总生物碱的含量(0.542%,n=3)比日本川芎(0.378%,n=4)高46.1%.结论:无论是根茎药材,还是加工成饮片,中国川芎中总生物碱的含量均显著高于日本川芎.以总生物碱为指标,中国川芎的质量优于日本川芎.建立的酸性染料比色法可准确测定中国川芎和日本川芎根茎药材及饮片中总生物碱的含量.

  • HPLC-DAD-MS检测川芎和日本川芎中的川芎嗪

    作者:洪远林;金玉青;姚艺新;林懋怡;魏伯平;姜卫东;吕光华

    目的:建立川芎药材中川芎嗪的检测方法,测定川芎和日本川芎中的川芎嗪,阐明川芎嗪是否存在及其含量高低.方法:HPLC-DAD-MS法,色谱柱为Waters Symmetry C18 (250 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(27∶1∶72),流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长280 nm;MS采用电喷雾正离子化模式检测.结果:在37份川芎和日本川芎样品中,有11份发现川芎嗪,占29.7%,平均含量为2.19 μg/g(n=11).其中,在27份川芎样品中,有6份检测出川芎嗪(0.60~ 11.75 μg/g);在10份日本川芎样品中,有5份检测出川芎嗪(0.61 ~ 3.05 μg/g).川芎嗪的存在与药材产地、性状特征、加工及贮藏方法之间无相关性,可能与土壤中微生物有关.结论:建立的方法可准确测定川芎和日本川芎中的川芎嗪;这两种药材中川芎嗪的含量很低,不是二者的主要功效成分,也不宜作为其质量评价的指标成分.

  • 川芎和引种日本川芎的RAPD分析与鉴定

    作者:罗禹;王天志;杨兵;陈璐

    目的 从DNA分子水平上探讨川芎和引种日本川芎的亲缘关系及不同居群的遗传变异.方法 提取35个样本的基因组DNA,并进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析和聚类分析.所选15个引物的RAPD,得出35个样本的聚类树状图.结果 川芎和引种的日本川芎有明显的种间遗传差异,居群内遗传变异小,小生境对遗传性状有影响.结论 所用方法可为川芎和日本川芎的鉴定及其道地性研究提供分子生物学依据.

  • 日本川芎药材的HPLC指纹图谱分析方法研究

    作者:徐宇;方鲁延;谢凌阳

    目的建立日本川芎药材的指纹图谱分析方法.方法用HPLC法建立日本川芎醇提取物的指纹图谱.结果和结论所用方法可靠,简便,为提高日本川芎质量控制标准提供参考.

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