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抗肿瘤干细胞药物体外活性评价方法
目的 以乳腺癌MCF-7细胞和盐霉素钠为例,建立体外抗癌干细胞药物活性评价的简单方法.方法 无血清、含有生长因子的DMEM/F12培养基培养MCF-7细胞,观察细胞的生长及体外干细胞球形成能力；流式细胞仪检测CD44+/CD24-细胞含量；将无血清培养的、富集的MCF-7干细胞以不同的数量接种到Nu/Nu裸鼠皮下,观察并检验致瘤能力；CCK-8法检测药物对悬浮乳状球样细胞生长的作用.结果 用无血清、含有生长因子的DMEM/F12培养基培养的MCF-7细胞,增殖缓慢,呈悬浮乳状球样；流式细胞仪检测CD44 +/CD24-细胞含量,10％胎牛血清的RPMI1640培养的MCF-7干细胞为(12.8 ±0.6)％,无血清培养的MCF-7干细胞为(97.1±2.4)％；裸鼠接种无血清培养的、富集的MCF-7干细胞约100个细胞即可见肿瘤生成.盐霉素钠对无血清培养条件下的富含癌干细胞的MCF-7细胞有较高的毒性.结论 所获得的CD44+/CD24-细胞具有乳腺癌干细胞特性,且超低黏附培养板和无血清环境可以促进悬浮球状细胞团的形成,CCK-8法是一种简便的体外评价抗癌干细胞药物的检测方法.
关键词： 癌干细胞 无血清培养 CD44+/CD24- 盐霉素钠 悬浮球样细胞团 -
乳腺癌手术前后,cd44+/cd24-,aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量变化与临床相关性分析
目的 观察正常人,乳腺癌患者手术前后cd44+/cd24-,aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞变化情况,分析其与乳腺癌的临床相关性.方法 方便选取该院30名健康医护人员以及自2016年1月—2017年6月收治的30例乳腺癌患者作为该次研究对象,检测健康人员与乳腺癌患者手术前后的cd44+/cd24-,并将aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量,分析数据.结果 健康人员与乳腺癌患者的aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物,两组人员的血浆细胞含量差异无统计学意义(P>0.05),采用乳腺癌外周血中的cd44+/cd24-作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物时,乳腺癌患者的血浆细胞含量(5.3±2.1)%明显高于健康人组(0.0±0.0)%,两组对比差异有统计学意义(P<0.05),且手术后,乳腺癌患者cd44+/cd24-,aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量均有降低,手术后cd44+/cd24-作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量(0.7±0.3)%明显小于手术前(5.3±2.1)%,手术后aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量(0.8±0.3)%明显小于手术前(3.7±1.2)%,各组数据对比均差异有统计学意义(P<0.05).结论 cd44+/cd24-,aldh1+作为人乳腺癌肿瘤干细胞标志物血浆细胞含量与乳腺癌疾病的发生和发展具有正相关关系.
关键词： 乳腺癌手术 CD44+/CD24- aldh1+ 血浆含量 临床相关性 -
乳腺癌及癌旁组织中CD44+/CD24-表达的差异及临床意义
收集我院经手术治疗、有明确病理诊断的初治乳腺浸润性导管癌患者的石蜡标本(1 12例),免疫组织化学检测CD447CD24-的表达,分析其与临床病理特征的相关性.结果发现CD44+/CD24-在乳腺癌组织的表达高于癌旁正常组织(P＜0.05),其表达情况与组织学分级有关(P＜0.05),与月经状况、年龄、脉管癌栓、肿瘤大小、分期、雌激素受体、孕激素受体、HER-2、P53、Ki67表达无关(P＞0.05).因此认为CD44+/CD24在乳腺癌组织的表达高于癌旁正常组织,其表达情况与组织学分级有关,而与其他临床病理特征无关.
关键词： 乳腺癌 CD44+/CD24- 干细胞 -
核基质结合区结合蛋白SATB1上调乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-的表达
目的 探讨核基质结合区结合蛋白,富含A-T序列特异性结合蛋白1(special A-T rich sequence binding protein 1,SATB1)对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24的影响及机制.方法 用SATB1相关小干扰RNA(SATB1 related small interfering RNA,SATB1-siRNA)双链寡核糖核酸干扰MDA-MB-231细胞;pEGFP-N1-SATB1-GFP真核表达质粒瞬时转染MCF7细胞后,流式细胞术检测SATB1对乳腺癌干细胞表型CD44+/CD24-表达的影响.结果 MCF7细胞转染SATB1后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显升高;MDA-MB-231细胞在SATB1-siRNA干扰后,表达CD44+/CD24-的细胞比例明显降低(P＜0.05).结论 SATB1可能在形成并维持乳腺癌肿瘤干细胞特性中起重要作用.
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肿瘤干细胞相关标记物CD44及CD24在乳腺癌中的表达及其意义
目的 探讨肿瘤干细胞相关标记物CD44及CD24在乳腺癌组织中的表达特点、CD44+/CD24-细胞与HER-2、ER、PR、CK5/6表达的相互关系及其与临床病理因素的关系.方法 采用免疫组化SP单染及双染法检测42例乳腺导管原位癌及126例乳腺浸润性导管癌组织中CD44及CD24的表达情况,检测126例乳腺浸润性导管癌组织中HER-2、ER、PR、CK5/6表达状况以进行免疫分型.结果 (1)CD44阳性定位于癌细胞膜.在浸润癌中阳性率为56.3%,在导管原位癌中阳性率为85.7%.两者差异有显著性意义(P<0.05).在不同分化程度的乳腺浸润性癌中,CD44阳性率分别为69.2%、58.1%及44.7%,差异有显著性意义(P<0.05).(2)CD24阳性表达于非癌性乳腺组织中小管的腔缘;在癌组织中除腔缘阳性外,可出现膜质阳性.在浸润癌中阳性率为32.5%,在导管原位癌中阳性率为64.3%.两者差异有显著性意义(P<0.05).(3)126例浸润性导管癌中CD44+/CD24-者65例,占51.6%;CD44+/CD24-阳性细胞在Luminal A型为47.5%、Luminal B型为42.9%、HER-2过表达型为13.0%、基细胞型为80.9%.各型间表达差异有显著性意义(P<0.05).Luminal A型、Luminal B型间表达差异无统计学意义(P<0.05).结论 CD44+/CD24-在基底细胞型乳腺癌中具有较高的表达率;CD44+/CD24-在乳腺原位癌中的表达高于浸润性癌,在低分化癌组织中的表达高于高分化癌;CD24由非癌组织的腔缘型向癌组织的膜质型转变提示CD24可能参与肿瘤的发生.
关键词： 乳腺肿瘤 CD44 CD24 CD44+/CD24- 免疫组化
