首页 > 文献资料
-
3-甲基腺嘌呤增强食管鳞癌Eca-109细胞放射敏感性的研究
目的 研究自噬在照射致人食管鳞癌Eca-109细胞死亡过程中的作用.方法 选用食管鳞癌Eca-109细胞,分为对照组、5 mmol/L给药组、10 mmol/L给药组、单纯照射组、照射+5 mmol/L组、照射+10 mmol/L组,共6组.采用Western blot检测不同处理组自噬标志物LC3B表达水平;GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后监测自噬体数量变化;MTT法检测不同处理组细胞活力;荧光染料Hoechst 33342观察不同处理组细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术检测不同处理组细胞周期和细胞凋亡;克隆形成实验检测食管鳞癌Eca-109细胞不同处理组放射敏感性.结果 Western blot显示,照射后自噬水平升高,自噬抑制后LC3BⅡ和LC3BⅡ/LC3B Ⅰ比值明显下降(F=25.64,P＜0.05);GFP-LC3转染食管鳞癌Eca-109细胞后,可见照射后自噬体荧光斑点明显增多,自噬抑制后自噬体明显减少(F=127.36,P＜0.05);抑制自噬协同照射后细胞活力明显低于单纯照射组(F=129.54,P＜0.05);抑制自噬后也增加了照射诱导的凋亡率和G2/M期阻滞细胞比;线性二次模型拟合剂量存活曲线显示,抑制自噬能增加食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性.结论 抑制自噬能提高食管鳞癌Eca-109细胞的放射敏感性,协同杀伤肿瘤细胞,提示抑制自噬或可用于辅助食管鳞癌的放射治疗.
关键词： 自噬 食管癌Eca-109细胞 放射敏感性 -
抑瘤宁对食管癌细胞系Eca-109作用的研究
目的研究抑瘤宁对食管癌细胞系Eca-109的生长抑制作用及其机制.方法采用MTT法检测抑瘤宁及其组方中各单药对体外培养Eca-109细胞的生长抑制作用;采用流式细胞仪检测细胞周期分布及凋亡率.结果抑瘤宁较组方中各单药更能明显的抑制Eca-109细胞的生长,流式细胞仪检测结果显示,各实验组S期细胞百分率明显升高,G0/G1期细胞百分率明显下降(其中各单药组、抑瘤宁组与对照组比较,P＜0.01;各单药组与抑瘤宁组比较,P＜0.01),细胞被阻滞于S期,细胞凋亡率升高.结论抑瘤宁对Eca-109细胞的增殖具有明显抑制作用,其机制可能与细胞周期阻滞和凋亡有关.
关键词： 抑瘤宁 食管癌Eca-109细胞 细胞周期 凋亡率 -
Fas、bcl-2和caspase8在去甲斑蝥素诱导食管癌细胞凋亡中的作用及机制
目的 探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡过程中Fas、bcl-2、caspase 8凋亡调节基因的相互关系及可能的作用机制.方法 流式细胞术分析去甲斑蝥素作用后细胞凋亡及增殖的变化,应用免疫细胞化学技术检测用药前后凋亡相关基因Fas、bcl-2、caspase8表达的变化.结果 去甲斑蝥素诱导的人食管癌Eca-109细胞发生形态改变.流式细胞仪分析结果 发现,食管癌Eca-109细胞在DNA组方图上出现典型的亚二倍体峰即凋亡峰,在细胞周期中的分布也发生了明显的变化.免疫细胞化学结果 显示.去甲斑螯素作用后食管癌Eca-109细胞Fas、caspase8蛋白表达明显升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05).结论 去甲斑蝥素能抑制食管癌Eca-109细胞增殖并诱导凋亡,其作用可能与上调Fas、caspase8蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达有关.
-
基于内质网应激通路探讨α-细辛醚对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制作用
目的:基于内质网应激通路探讨α-细辛醚诱导人食管癌Eca-109细胞增殖抑制作用及其相关机制.方法:采用MTT法检测α-细辛醚对Eca-109细胞的增殖抑制情况;荧光定量PCR技术检测内质网应激通路相关基因Caspase-4和GRP78 mRNA的表达情况;Westem Blot检测Caspase-4和GRP78蛋白表达水平.结果:α-细辛醚可显著抑制Eca-109细胞增殖,并具有一定的剂量时间反应关系;α-细辛醚不同剂量(25μg/ml、50μg/ml)分别作用24h、48h后Caspase-4 mRNA和蛋白的表达减少,GRP78 mRNA和蛋白的表达增加.结论:α-细辛醚对人食管癌Eca-109细胞的增殖具有抑制作用,并呈现明显的剂量时间反应关系,其机制可能是通过上调GRP78,下调Caspase-4的表达实现的.
关键词： α-细辛醚 食管癌Eca-109细胞 内质网应激 增殖抑制
