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人Rb94基因联合γ射线照射对K150细胞生长影响的体外研究
目的 探讨外源性Rb94基因联合γ射线照射对食管癌细胞株K150生长的抑制作用,为临床上进行Rb94基因.放射治疗肿瘤奠定实验基础.方法 将重组腺病毒Ad-Rb94于体外转染K150细胞,转染后进行6 Gy~(137)C8 γ射线照射,数字随机表法分为空白对照组、Ad-LacZ对照组、Ad-Rb94组、照射组和Ad-Rb94联合照射组,观察K150细胞的生长曲线、细胞周期、细胞凋亡和Rb94基因表达的变化.结果 Ad-Rb94组、照射组和联合照射组对K150细胞生长均具有抑制作用,联合照射组的抑制效应强(45.49%),明显高于Ad-Rb94组(20.26%)和照射组(35.11%)(χ~2=14.25,P<0.05).联合照射组K150细胞出现明显的G_1期阻滞和细胞凋亡,G_1期细胞和凋亡细胞所占比例高,分别达到73.4%和15.7%.联合照射组K150细胞中Rb94基因表达量多,分别是Ad-Rb94组和空白对照组的1.87倍和2.92倍.结论 Rb94基因联合γ射线照射对食管癌细胞的抑瘤作用具有协同效应,有效地抑制肿瘤细胞的生长.
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Rb94基因联合放射治疗对荷瘤裸小鼠食管癌细胞生长的抑制作用
目的: 探讨人视网膜母细胞瘤Rb94基因联合电离辐射对荷瘤裸小鼠食管癌细胞生长的抑制作用,阐明Rb94基因与放射治疗(放疗)抑制肿瘤细胞生长的协同作用.方法: 将食管癌K150细胞接种于BALB/c-nu裸小鼠建立肿瘤模型.实验分为对照组(未进行处理)、Ad-LacZ组(为含LacZ基因但不含Rb94基因的对照腺病毒,分别于0、3和7 d 以Ad-LacZ 感染瘤体)、Ad-Rb94组(分别于0、3和7 d以Ad-Rb94感染瘤体)、照射组(分别于1、4和8 d进行4 Gy γ射线局部照射瘤体)和Ad-Rb94联合照射组(联合组,Ad-Rb94感染后进行4 Gy γ射线局部照射瘤体).检测各组小鼠食管癌瘤体体积、瘤体质量、肿瘤生长抑制率和肿瘤组织中ABL及JNK的表达水平,并对肿瘤组织进行病理学分析.结果: 与对照组比较,Ad-Rb94组、照射组和联合组裸小鼠肿瘤生长速度缓慢, 肿瘤生长出现抑制效应;治疗第15天联合组小鼠肿瘤体积明显小于Ad-Rb94组和照射组,与对照组和Ad-LacZ组比较差异有统计学意义(F=26.7,F=23.8,P<0.01).治疗结束后联合组小鼠瘤体质量轻,肿瘤生长抑制率高达81.16%,明显高于Ad-Rb94组(57.84%)和照射组(38.20%)(P<0.01).与对照组比较,联合组小鼠肿瘤组织中ABL和JNK的表达水平明显升高(P<0.01).
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重组腺病毒Ad-Rb94基因联合放疗对人肝癌细胞生长的抑制作用
目的 探讨重组腺病毒Ad-Rb94基因联合放射治疗对人肝癌细胞的联合抑瘤作用.方法 将重组腺病毒Ad-Rb94基因导入人肝癌细胞株HepG2,观察联合放射治疗对细胞生长、细胞周期及凋亡的影响.结果 Ad-Rb94基因组、放疗组和Ad-Rb94基因联合放疗组HepG2细胞的生长均受到抑制,尤其在转染后96h细胞存活数量低,与Ad-lacZ组和空白对照组比较差异均有显著性(P<0.05).联合治疗组HepG2细胞生长为缓慢, Rb94基因转染后96h Ad-Rb94联合放疗组的抑制作用均明显高于Ad-Rb94组和放疗组(P﹤0.05).Ad-Rb94组、放疗组及Ad-Rb94联合放疗组HepG2停留在G2/M期的细胞增加,G0/G1期和S期细胞数量减少,凋亡细胞数量增加,其中以联合治疗组G2/M期细胞和凋亡细胞所占比例高.结论 Ad-Rb94基因联合放疗具有协同作用,有效地抑制肝癌细胞的生长.
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人Rb94基因联合γ-辐射抑制乳腺癌细胞生长的研究
目的 构建含有人类视网膜母细胞瘤94基因(Rb94基因)的腺病毒表达载体,研究其联合γ-辐射抑制人恶性肿瘤细胞生长的作用.方法 从人类胚胎中提取总RNA,经逆转录得到目的cDNA,用PCR技术扩增目的基因片段,将其连接入载体pENTRTM1A,然后经LR重组再转入到表达载体 pAd/CMV/V5-DESTTM中,对重组体进行鉴定.然后联合γ-辐射作用于乳腺癌细胞,观察细胞生长曲线的变化.结果 成功构建了含Rb94基因的腺病毒表达重组体并通过鉴定,联合γ-辐射作用于乳腺癌细胞后有更强的抑制效应.结论 本实验构建的人Rb94基因重组腺病毒表达质粒是成功的,与γ-辐射联合共同作用于肿瘤细胞有更强的抑制肿瘤细胞生长的作用.
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Rb94基因联合放射治疗对卵巢癌细胞生长的影响
目的:探讨外源性Rb94基因联合放疗对卵巢癌细胞生长的抑制作用,为肿瘤的Rb94基因-放射治疗提供实验依据.方法:应用携带Rb94基因的复制缺陷型腺病毒(Ad-Rb94)于体外转染卵巢癌细胞株ES-2,用MTT比色法和流式细胞术观察Rb94基因联合放疗后ES-2细胞的生长曲线和细胞周期的变化.结果:Ad-Rb94基因组、单纯放疗组和Ad-Rb94基因联合放疗组ES-2细胞生长均明显受到抑制,与Ad-lacZ组和空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05).其中联合放疗组ES-2细胞生长为缓慢,与Ad-Rb94基因组和单纯放疗组比较均有显著性差异(P<0.05).Ad-Rb94组和放疗组大量的ES-2细胞停留在G1期,而G2期和S期细胞明显减少,联合治疗组细胞停留在G1期多.结论:腺病毒介导的外源性Rb94基因可明显抑制ES-2细胞的生长,与放射治疗联合应用具有相加和协同效应.
