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  • 重组肉毒毒素B重链结合区片段的表达、纯化及其抗原性分析

    作者:谢亮;王俊虹;康琳;高姗;王景林

    目的:克隆、表达并纯化肉毒毒素B重链结合区C端(BoNT/B Hc)保护性抗原片段.方法:采用PCR扩增BoNT/B Hc基因,插入表达载体pET-His,转化E.coli BL21(pLys)细胞获得表达工程菌株,并对诱导表达条件和纯化条件进行优化.利用Western印迹和间接ELISA方法鉴定rBoNT/B Hc的抗原性.结果:表达工程菌BL21/pETHis-BHc于37℃经0.2 mmol/L IPTG诱导6 h后,目的蛋白获得高表达,约占菌体总蛋白的24%.经过Ni-NTA亲和层析柱一步纯化,rBoNT/B Hc的纯度可达96%以上.Western印迹和间接ELISA均显示其具有良好的抗原性.结论:成功克隆、表达并纯化了BoNT/B Hc片段,并可被抗天然BoNT/B马血清所识别,为建立快速检测方法和制备相应的抗体及亚单位疫苗奠定了基础.

  • 肉毒毒素B在儿童脑性瘫痪中的应用

    作者:王雅洁

    肉毒毒素(BTX)是由肉毒菌素产生的一种细菌外毒素,是已知毒的微生物毒素之一.BTX-B是由B型厌氧梭状肉毒芽胞杆菌Bean株产生的神经毒素,BTX-B不干扰内化、易位过程,在细胞基质裂解N-乙基-马来酰亚胺-敏感因子-附着蛋白受体复合物中的囊泡相关膜蛋白,干扰突触囊泡锚靠、融合,从而导致肌肉化学性失神经,降低肌肉痉挛.BTX-B还可适用于对BTX-A无反应以及不随意肌肌紧张的患儿.

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