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人胚胎血管平滑肌细胞文献资料
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人血管平滑肌细胞的原代培养及其钙化模型的建立
目的 利用β-甘油磷酸盐处理人血管平滑肌细胞(human vascular smooth muscle cells, HVSMCs )制备体外血管钙化模型.方法 用组织贴壁法从人胚胎脐带动脉中分离原代人主动脉平滑肌细胞,原代细胞通过抗体α-sm-actin 染色鉴定,将传4~6代的细胞分为钙化组和对照组,对照组用正常DMEM培养基培养,钙化组加入10 mmol/L β-甘油磷酸盐诱导细胞钙化,连续培养10 d.茜素红S染色及碱性磷酸酶法鉴定.结果 :分离的原代细胞经S-P染色鉴定为阳性,呈淡黄色.钙化组细胞诱导钙化后,细胞增殖缓慢,并形成囊泡结构,茜素红S染色形成红色的钙化结节,钙化组碱性磷酸酶活性较对照组在不同时间点(4,6,8,10 d)都有所增加(P＜0.01).结论 :β-甘油磷酸盐体外能够诱导HVSMC钙化,此方法诱导的钙化模型是一种良好的研究血管疾病方面的体外模型.
关键词： 人胚胎血管平滑肌细胞 原代培养 钙化模型
