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葡萄糖预处理对大鼠心肌细胞糖毒性损伤的保护作用
目的 探讨葡萄糖预处理对原代心肌细胞在高糖诱导的糖毒性损伤中的保护作用及其可能机制.方法 模拟体内高糖状态建立SD乳鼠原代心肌细胞高糖模型,设置对照组、高糖模型(HG)组和预处理(PG)组,对照组给予常规培养基(DMEM,5mmol/L D-glucose)培养6d,HG组给予高糖(50mmol/L D-glucose)培养96h,PG组在建模前给予葡萄糖预处理(10mmol/L D-glucose)4h,循环3次,每次预处理间隔为常规培养(DMEM,5mmol/L D-glucose)4h.采用MTS实验检测心肌细胞活性,TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率,JC-1染色法检测线粒体膜电位,Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3的表达水平.结果 MTS检测结果显示,HG组心肌细胞活性明显低于对照组(P<0.01),而与HG组相比,PG组心肌细胞活性有所增强(P<0.05).TUNEL检测结果显示,HG组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01),而与HG组相比,PG组心肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05).JC-1检测结果显示,HG组线粒体膜电位明显低于对照组(P<0.05),而与HG组相比,PG组心肌细胞线粒体膜电位明显升高(P<0.05).Western blotting检测结果显示,与对照组比较,HG组Bcl-2表达减少,Bax、caspase-3表达增多,而与HG组相比,PG组Bax、caspase-3表达减少,Bcl-2表达增多,差异均有统计学意义(P<0.05).在上述各指标中,对照组与PG组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 葡萄糖预处理能够增强细胞活性、减少细胞凋亡、减轻线粒体损伤,从而减轻高糖对心肌细胞的糖毒性损伤.
