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RNAi沉默dUTPase对SW620细胞黏附的影响
目的采用RNAi沉默dUTPase的表达,观察SW620细胞黏性的改变.方法合成两条编码发夹siRNA序列的单链DNA,并将其克隆到pSilenCircle载体中, 构建重组质粒sidUTPase/pSilenCircle和无关基因的重组质粒siFly/pSilenCircle.以上述重组质粒分别转染SW620细胞, RT-PCR和Western blot检测dUTPase的表达, 异质黏附实验分析细胞黏附性的改变.结果成功地构建了2个dUTPase发夹siRNA的真核表达载体sidUTPase/pSilenCircle和无关基因重组质粒siFly/pSilenCircle.与siFly/pSilenCircle转染组比较,sidUTPase/pSilenCircle转染组 SW620细胞dUTPase的表达明显下调, 细胞异质黏附能力减弱.结论构建的dUTPase 发夹siRNA 的真核表达载体sidUTPase/pSilenCircle可有效抑制SW620细胞的dUTPase表达,降低细胞的异质黏附性.
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胸苷酸合成酶、胸苷磷酸化酶和dUTPase在大肠癌组织中的表达及其临床病理学意义
目的 观察胸苷酸合成酶(TS)、胸苷磷酸化酶(TP)和dUTPase在大肠癌组织及癌旁正常组织中的表达情况,揭示大肠癌患者对5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗的敏感性.方法 应用免疫组化方法检测33例大肠癌组织及癌旁正常组织中TS、TP和dUTPase的表达情况.结果 33例大肠癌组织中TS、TP和dUTPase阳性表达率明显高于癌旁正常组织；低分化腺癌患者TS、dUTPase高表达病例数其阳性表达率高于中、高分化腺癌患者；有淋巴结转移患者TS、TP和dUTPase阳性表达率高于无淋巴结转移患者；男性患者TS高表达病例数其阳性表达率高于女性患者；TS、TP、dUTPase表达与TNM分期呈正相关；dUTPase在大肠癌中的表达与年龄、性别、分化程度及有无淋巴结转移无关.大肠癌组织中TS、dUTPase表达水平与5-FU化疗患者的预后呈负相关,TP表达水平与5-FU化疗患者的预后呈正相关.结论 大肠癌组织中TS、TP和dUTPase的表达水平可以作为患者对5-FU为主的化疗疗效及预后的判断指标.
