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Hoxc6在胚胎间充质干细胞成骨分化中的作用
目的:研究homeobox c6(Hoxc6)在胚胎间充质干细胞成骨分化中的作用。方法 BMP4诱导小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞体外成骨分化。逆转录病毒转染C3H10T1/2细胞,构建过表达Hoxc6的稳定转染细胞,进行Hoxc6获得性功能研究。慢病毒转染 C3H10T1/2细胞,构建基因敲除 Hoxc6的稳定转染细胞,进行Hoxc6丧失性功能研究。碱性磷酸酶活性实验检测成骨早期分化指标-碱性磷酸酶活性。实时荧光定量反转录PCR( real time reverse transcription PCR,qRT-PCR)检测成骨分化相关基因-碱性磷酸酶和骨钙素的表达。结果过表达Hoxc6明显增强C3H10T1/2细胞的碱性磷酸酶活性,在mRNA水平促进碱性磷酸酶和骨钙素的基因表达。基因敲除Hoxc6明显抑制C3H10T1/2细胞的碱性磷酸酶活性,明显抑制碱性磷酸酶和骨钙素的基因表达。结论 Hoxc6具有促进胚胎间充质干细胞体外成骨分化的功能。
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HOXC6同型蛋白2对根尖牙乳头干细胞成骨/成牙分化功能的影响
目的 探讨同源盒基因C6同型蛋白2对牙源性间充质细胞成骨/成牙分化的影响.方法 成骨诱导培养基诱导人根尖牙乳头干细胞体外成骨/成牙分化;逆转录病毒转染构建过表达HOXC6-ISO2稳定转染牙乳头干细胞进行HOXC6-ISO2获得性功能研究;碱性磷酸酶活性实验检测成骨/成牙早期分化指标-碱性磷酸酶活性;茜素红染色及钙离子定量分析检测干细胞体外矿化能力;实时荧光定量反转录PCR检测成骨/成牙分化相关基因-Sp7转录因子、Runt相关转录因子2和骨钙素及同源盒基因C6下游基因胰岛素结合蛋白5的表达.结果 结果显示过表达同源盒基因C6同型蛋白2明显抑制牙乳头干细胞的碱性磷酸酶活性;茜素红染色及钙离子定量分析结果显示过表达同源盒基因C6同型蛋白2明显抑制牙乳头干细胞体外矿化能力;实时荧光定量反转录PCR显示过表达同源盒基因C6同型蛋白明显抑制骨钙素的表达,并且抑制下游基因胰岛素结合蛋白5的表达.结论 同源盒基因C6同型蛋白2通过抑制下游基因胰岛素结合蛋白5抑制牙乳头干细胞体外成骨/成牙分化的功能.
关键词: Hoxc6 同型蛋白2 根尖牙乳头间充质干细胞 成骨分化