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B16黑色素瘤细胞、淋巴细胞和巨噬细胞混合培养上清的体外抗肿瘤作用
目的 探讨B16黑色素瘤细胞、淋巴细胞和巨噬细胞混合培养上清对淋巴细胞的趋化、活化及其体外抗肿瘤作用.方法 制备细胞培养上清液,分为淋巴细胞、巨噬细胞和B16细胞混合培养组及单纯B16细胞培养组.应用Boyden小室法检测两组培养不同时间(0.5、1、2、4、8和12h)的上清液对淋巴细胞的趋化作用(各组趋化时间均为12h)；应用CCK-8检测混合培养组和单纯B16细胞培养组不同培养时间点(0.5、1、2、4、8和12h)的培养上清对淋巴细胞的激活作用.结果 在培养时间为0.5、1、2、4、8和12h,混合培养组所趋化的淋巴细胞数量分别是(1.00±0.82)× 104、(7.00±1.63)×104、(9.50±0.58)×104、(11.25±2.36)×104、(17.25±1.71)×104和(21.50±1.29)×104,而单纯培养组所趋化的淋巴细胞数量分别是(0.00±0.00) ×104、(0.25±0.50)×104、(1.75±0.96)×104、(5.25±0.96)×104、(5.75±1.26)×104和(10.75±3.20)×104,除0.5 h外,其他培养时间点,混合培养组对淋巴细胞的趋化作用强于单纯培养组(P＜0.05).除0.5 h和1h外,其他培养时间点,混合培养组对于淋巴细胞的激活作用强于单纯培养组(P＜0.05),培养12h的上清激活作用强于其他各时间点(P＜0.05).结论 细胞混合培养的上清液对淋巴细胞的趋化作用明显,并能较强地活化淋巴细胞从而对肿瘤细胞产生杀伤作用.
关键词： 趋化作用 肿瘤 肿瘤浸润性T淋巴细胞 细胞杀伤作用 肿瘤培养上清 -
黄酮类化合物调控肿瘤细胞自噬的研究进展
自噬是一种保守的细胞自我降解方式,是将受损细胞器或大分子物质由自噬泡包绕再通过自噬溶酶体降解再利用的过程.自噬在细胞的生物合成、营养和代谢平衡及应激与存活中具有重要作用.调控自噬能够引发多重级联反应,可以应用于肿瘤治疗.黄酮类化合物作用于不同的肿瘤细胞系会诱导作用各异的自噬.黄酮类化合物可以诱导自噬通过非凋亡或非典型凋亡途径较为直接地抑制肿瘤细胞增殖,也可以在诱导自噬后进一步引发凋亡等其他致死方式间接抑制肿瘤细胞增殖,或通过抑制保护性自噬从而强化其他形式的杀伤作用,但有时也会诱导肿瘤细胞发生保护性自噬,弱化细胞杀伤作用.对近10年来黄酮类化合物调控肿瘤细胞自噬的研究进展进行了综述,为中药调控细胞自噬的相关研究提供参考.
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肝癌患者外周血自然杀伤细胞的功能分析
目的 探讨肝癌患者外周血自然杀伤 (NK) 细胞的数目和功能,以进一步了解肝癌的发病机制. 方法 入选35例肝癌患者和24名健康人,用流式细胞仪检测外周血NK细胞亚群频率;通过检测NK细胞分泌干扰素(IFN) γ的能力和杀伤K562细胞的能力,评价NK细胞的功能.数据用均数±标准差(χ±s)表示,不同组间的比较采用SPSS13.0进行Mann-Whitney非参数检验分析.结果 与健康对照组相比,肝癌患者外周血NK细胞的频率明显降低 (12.19%±10.85%与24.01%±8.78%,u=4.01,P<0.01);其中CD56~(bright)CD16~(neg) NK细胞频率增加 (0.62%±0.39%与0.48%±0.28%,u=1.96,P<0.05),而CD56~(dim)CD16~(pos).NK细胞频率明显降低(11.59%±7.49%与22.66%±8.84%,u=3.92,P<0.01).肝癌患者外周血NK细胞经过佛波酯刺激后分泌IFN γ的能力降低 (有效细胞13.31%),并且对K562细胞的杀伤活性明显降低,以30:1、10:1、1:1与K562细胞混合后,其杀伤效率在肝癌组与对照组分别为16.72%±7.33%与26.29%±12.36%(u=2.52,P<0.05)、8.01%±4.40%与13.09%±5.03%(u=3.32,P<0.05)、3.51%±2.82%与3.42%±1.64%(u=1.56,P>0.05).结论 肝癌患者体内NK细胞功能受损,抗肿瘤能力下降,这可能是肝癌患者抗肿瘤免疫应答缺陷的机制之一.
