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B16黑色素瘤细胞、淋巴细胞和巨噬细胞混合培养上清的体外抗肿瘤作用
目的 探讨B16黑色素瘤细胞、淋巴细胞和巨噬细胞混合培养上清对淋巴细胞的趋化、活化及其体外抗肿瘤作用.方法 制备细胞培养上清液,分为淋巴细胞、巨噬细胞和B16细胞混合培养组及单纯B16细胞培养组.应用Boyden小室法检测两组培养不同时间(0.5、1、2、4、8和12h)的上清液对淋巴细胞的趋化作用(各组趋化时间均为12h)；应用CCK-8检测混合培养组和单纯B16细胞培养组不同培养时间点(0.5、1、2、4、8和12h)的培养上清对淋巴细胞的激活作用.结果 在培养时间为0.5、1、2、4、8和12h,混合培养组所趋化的淋巴细胞数量分别是(1.00±0.82)× 104、(7.00±1.63)×104、(9.50±0.58)×104、(11.25±2.36)×104、(17.25±1.71)×104和(21.50±1.29)×104,而单纯培养组所趋化的淋巴细胞数量分别是(0.00±0.00) ×104、(0.25±0.50)×104、(1.75±0.96)×104、(5.25±0.96)×104、(5.75±1.26)×104和(10.75±3.20)×104,除0.5 h外,其他培养时间点,混合培养组对淋巴细胞的趋化作用强于单纯培养组(P＜0.05).除0.5 h和1h外,其他培养时间点,混合培养组对于淋巴细胞的激活作用强于单纯培养组(P＜0.05),培养12h的上清激活作用强于其他各时间点(P＜0.05).结论 细胞混合培养的上清液对淋巴细胞的趋化作用明显,并能较强地活化淋巴细胞从而对肿瘤细胞产生杀伤作用.
关键词： 趋化作用 肿瘤 肿瘤浸润性T淋巴细胞 细胞杀伤作用 肿瘤培养上清 -
PG肿瘤分泌物对PBMC活性及细胞因子分泌的影响
目的 应用PG肿瘤细胞分泌的上清液培养正常外周血单个核细胞(PBMC),探讨PG肿瘤细胞分泌物对正常PBMC的活性及分泌细胞因子的影响,以进一步揭示肿瘤的免疫逃逸机制.方法 将不同浓度的肿瘤细胞培养上清液与体外分离的PBMC一起培养,用MTT法检测细胞代谢活性,流式细胞术检测细胞内细胞因子分泌的变化情况.结果 PG培养上清能够提高PBMC活性,并使Th1、Th2类细胞因子表达增加.结论 肿瘤上清确实能使PBMC活化,同时激活PBMC细胞分泌细胞因子.
