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FTA样本洗提卡用于子宫颈癌筛查的临床应用价值
目的 探讨固体FTA样本洗提卡(FTA卡)在宫颈癌筛查的HPV DNA分型检测中作为储存与转运待检样本载体的临床应用价值.方法 以北京大学深圳医院宫颈门诊因HPV或细胞学检查阳性行阴道镜下宫颈活检的102例患者为研究对象,由妇科医师采集宫颈脱落细胞样本,分别使用固体FTA卡和细胞保存液作为样本储存和转运的介质,均采用PCR为基础的质量阵列基质辅助激光电离解析飞行时间质谱系统(MALDI-TOF)法进行高危型HPV分型检测,比较FTA卡与常规的液体介质作为样本储存与转运载体在宫颈癌筛查中的有效性.结果 102例患者中,液体介质保存的样本检测的HPV感染率为69.6％,FTA卡为66.7％,两组比较,差异无统计学意义(x2=0.250,P＞0.05).两种保存方法检测HPV阳性率有很好的一致性(Kappa值=0.932,P＜ 0.001).两种方法检测的HPV型别比较,差异无统计学意义(x2=0.250,P＞0.05),且两者具有很好的一致性(Kappa=0.930,P＜0.001).以病理诊断为金标准,FTA卡和液体介质保存样本检测HPV对于检出≥CIN2的曲线下面积分别为0.718和0.699(P＜0.05);检出≥CIN3的曲线下面积分别为0.695和0.678(P＜0.05).结论 FTA卡和液体介质保存宫颈细胞样本在HPV分型检测中具有良好的一致性,对于高级别宫颈病变的诊断效率亦相当.由于固体FTA卡体积小、便于转运、污染风险小、且简化了样本DNA的提取,故将其作为一种新的HPV检测样本储存方法用于宫颈癌筛查具有很高的临床应用价值.
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田鼠巴贝虫感染FTA-环介导等温扩增检测技术的建立
目的 建立敏感、特异、高效的检测田鼠巴贝虫FTA-环介导等温扩增技术(LAMP).方法 根据GenBank公布的田鼠巴贝虫基因序列,就细胞色素B基因保守序列设计了多套LAMP引物,利用LAMP RealTime Turbidimeter LA-320仪筛选佳引物、反应条件,建立LAMP检测方法,从保存有血液样本的FTA卡片中提取田鼠巴贝虫DNA进行LAMP,观察检测效果.结果 设计的4组引物做LAMP试验,其中以引物1,佳反应温度为64℃,恒温下作用,敏感性高,可在1h内完成,其检出限量为0.687 fg/μL,而PCR的低检测量为0.687 pg/μL,与间日疟原虫、恶性疟原虫、卵形疟原虫、三日疟原虫、诺氏疟原虫、冈地弓形虫、利什曼原虫、冈比亚锥虫均无交叉反应.以建立的FTA-LAMP法检测20份PCR检测阳性的田鼠巴贝虫感染者血样,其阳性符合率100％.结论 成功建立了检测田鼠巴贝虫特异性细胞色素B基因的FTA-LAMP方法,该法特异性强、灵敏度高、简便、快速、适于现场应用.
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FTA卡在模板DNA制备中的应用研究
目的:本文详细介绍了一种简便、快速、安全的用于DNA制备的方法.方法:查阅了大量国内外关于FTA卡及其应用方面的文章.结果:详细介绍了FTA卡在模板DNA制备以及在基因的储藏、医学检测以及食源性致病菌的检测方面的具体应用.结论:FTA卡可作为一种通用、快速、简便的DNA模板制备方法可用于生物学各方面的研究.
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FTA卡在微量血痕DNA多态性分析中的应用
目的 探索FTA卡样本DNA小检出量及同一FTA卡样本进行多项目检测的可行性.方法 制作含有不同浓度DNA FTA卡,使用Identifiler试剂盒进行检验;对同一FTA卡样本先后使用Identifiler、Y-filer试剂盒进行扩增及线粒体高变区HVI区测序,使用ABI3130测序仪检测各扩增产物.结果 载有0.5ngDNA的FTA卡扩增产物即可正确分型,对同一血痕样本使用不同试剂盒检验,均可清晰正确判型,线粒体高变区HVI区测序图清晰,且各检验结果均与对照一致.结论 载有0.5ngDNA的FTA卡扩增产物可用于DNA分型检测,FTA卡对DNA结合较稳定,可用于多项目检测.
