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外周血单个核细胞在Sonic hedgehog信号通路中的活化表达
目的探讨Sonic hedgehog阻断抗体(Shh Ab)对外周血单个核细胞(PBMCs)抗胃癌MC细胞作用的表达。方法 Ficoll密度梯度离心法分离正常人PBMCs,并与胃癌MC细胞(GES-1细胞经亚硝酰胺类化合物处理)建立共培养体系；RT-PCR观察Shh、Gli-1基因的表达并进行半定量数据分析；于共培养体系中加入Shh阻断抗体,流式细胞术检测CD3、CD5、CD69分子表达。结果RT-PCR结果显示Gli-1mRNA在MC+Shh Ab细胞组值为0.2845±0.0025,低于MC 细胞组的0.5167±0.0109(P<0.05)；流式细胞检测Shh Ab可促进CD3、CD69分子表达,对CD5分子没有显著影响；Shh Ab增强PBMCs对MC细胞的杀伤。结论 Shh Ab可促进PBMCs化,增强PBMCs抗亚硝酰胺类化合物致癌机制的作用。
关键词： Sonic hedgehog蛋白 GES-1细胞 MNNG 淋巴细胞 -
Sonic hedgehog蛋白在糖尿病肾脏病肾间质纤维化中的表达及临床意义
目的 探讨Sonichedgehog(Shh)在糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)中的表达及其与肾间质纤维化的关系及临床意义.方法 收集40例DKD、12例正常肾脏组织的病理切片标本,并收集患者糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、血清白蛋白(serum albumin,Alb)、血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平、24 h尿蛋白定量等临床数据.通过CKD-EPI公式估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR).Masson染色观察肾脏病理形态并依据肾间质纤维化及肾小管病变评分分为4组,分别为正常、1级、2级、3级纤维化.免疫组化检测Shh、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)在DKD中的表达,分析DKD患者中Shh与α-SMA表达的相关性以及与HbA1c、24 h尿蛋白定量、血肌酐、eGFR的相关性.结果 正常肾脏Shh的表达很少,而DKD患者中Shh表达显著增加,主要表达在近端、远端肾小管上皮细胞,以近端小管为著.随着间质纤维化程度加重,Shh阳性强度逐渐增加(P＜0.05).α-SMA主要表达于肾间质中,随着纤维化分级增加,α-SMA在肾间质中的表达增加,各组间差异均有统计学意义(P＜0.05).Shh在DKD肾间质纤维化中的阳性程度与α-SMA呈正相关(rs=0.82,P＜0.001),与HbA1c呈正相关(rs =0.54,P＜0.001),与血肌酐呈正相关(rs=0.67,P＜0.001),与24h尿蛋白定量呈正相关(rs=0.61,P＜0.001),与eGFR呈负相关(rs=-0.65,P＜0.001).结论 DKD患者中肾小管上皮细胞高表达Shh,提示Shh信号通路被激活,可能是DKD肾间质纤维化发展的一个重要因素.
