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巴戟天含药血清对成骨-破骨细胞共育体系CAII、NFAT2mRNA表达的影响
目的 探讨不同浓度巴戟天含药血清对体外培养成骨-破骨细胞共育体系中碳酸酐酶II(CAII)、活化T细胞核因子(NFAT2)mRNA表达的影响.方法 取24 h内新生SD乳鼠头盖骨分离培养成骨细胞,取5周龄SD大鼠四肢长骨骨髓基质细胞,加入集落细胞刺激因子(M-CSF)和细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导培养破骨细胞.采用ALP染色鉴定成骨细胞,TRAP染色、骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色、电镜等扫描鉴定破骨细胞,体外建立成骨-破骨细胞共育体系,设置高、中、低3种浓度巴戟天含药血清组和对照组,干预3d后提取各组总RNA,应用Real Time PCR(RT-PCR)方法测定各组CAII、NFAT2mRNA表达并进行统计学分析.结果 不同浓度巴戟天含药大鼠血清对成骨-破骨细胞共育体系CAII、NFAT2 mRNA的表达均有抑制作用,且其抑制作用表现出一定的浓度依赖性;各组间差异有统计学意义(P＜0.05).结论 巴戟天含药血清可抑制成骨-破骨细胞共育体系CAII、NFAT2mRNA表达,从而达到降低破骨细胞分化成熟及骨吸收活性.
关键词： 巴戟天 成骨-破骨细胞共育体系 碳酸酐酶II 活化T细胞核因子2 -
加味三根汤含药血清对成骨-破骨细胞共育体系中破骨细胞功能及IL-1 β、TNF-α表达的影响
目的 检测成骨-破骨细胞共育体系中应用加味三根汤含药血清后抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)以及白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化,探讨加味三根汤的作用机制.方法 建立成骨-破骨细胞共育体系,制作SD大鼠含药血清,分为空白对照组,加味三根汤低、中、高剂量组,每组设6个复孔,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测共培养体系上清液中TRACP及IL-1β、TNF-α的含量.结果 经鉴定成功培养成骨细胞和破骨细胞,并建立成骨-破骨细胞共育体系.加味三根汤含药血清中、高剂量组TRACP活性低于空白血清对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).与空白血清对照组比较,加味三根汤中、高剂量组IL-1β含量有所下降,加味三根汤高剂量组TNF-α含量降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 加味三根汤能够抑制共育体系中破骨细胞的功能,此作用可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的分泌而达到.
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淫羊藿苷对SD大鼠成骨-破骨细胞共育体系的影响
目的:检测成骨-破骨细胞共育体系中应用淫羊藿苷后碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的变化,探讨淫羊藿苷的作用机理.方法:建立成骨-破骨细胞共育体系,分为淫羊藿组、空白对照组和阳性对照三组,每组于同一培养板重复6孔,分别检测上清液中ALP和TRACP的含量,并进行组内和组间的统计学分析.结果:经鉴定成功培养成骨细胞和破骨细胞,并建立成骨-破骨细胞共育体系,测定结果显示,在ALP活性中,三组间比较差异显著(P＜0.01),LSD法组内比较淫羊藿苷组与空白对照组差异显著(P＜0.01);淫羊藿苷组与阳性对照组无显著性差异(P＝0.546);在TRACP活性中:三组间比较差异显著(P＜0.01),LSD法比较淫羊藿苷组与空白对照组比较差异显著(P＜0.01);淫羊藿苷组与阳性对照组无显著性差异(P＝0.10).结论:淫羊藿苷可以增强共育体系中成骨细胞的活性,抑制破骨细胞的功能.
关键词： 成骨-破骨细胞共育体系 淫羊藿苷 ALP TRACP
