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半胱氨酸蛋白水解酶抑制剂减少大鼠心肌细胞凋亡的研究
目的验证半胱氨酸蛋白水解酶(Caspase)在心肌缺血再灌注损伤大鼠模型中的活性作用,测定可溶性脂肪酸合成酶(sFas)和脂肪酸合成酶配体(FasL)的血中浓度以及Caspase抑制剂对心肌的保护作用.方法制作大鼠心肌缺血模型,设对照组;实验组静脉投予Caspase抑制剂(DEVD).股静脉采血后,取出心脏.应用免疫印迹法、TUNEL法、酶联免疫法(ELISA)测定.结果实验组缺血再灌注区心肌组织Caspase原被水解活化.实验组的TUNEL阳性细胞数明显减少,与对照组之间有显著差异.DEVD的投予可以使再灌注损伤导致的心肌细胞凋亡数减少大约30%.实验组与对照组之间sFas水平有显著差异.结论Caspase是心肌缺血再灌注损伤中应激所必须的中介物,DEVD能够减少心肌缺血再灌注损伤所致的细胞凋亡.我们提出,DEVD可能对心肌细胞起保护作用,有助于心肌梗死的治疗,为Caspase抑制剂尽早应用于心肌梗死早期患者提供准确可靠的理论依据.
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氟对大鼠切牙细胞凋亡以及Caspase-3和Caspase-8活力的影响
目的 研究在氟中毒引起氟斑牙时,氟对大鼠切牙细胞凋亡、天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)和Caspase-8活力的影响.方法 将20只健康成年SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和低(10mg/L)、中(50mg/L)和高(100mg/L)浓度NaF染毒组,每组5只.采用自由饮水方式进行染毒,每只每日饮水量约为40 ml,连续染毒120 d.采用流式细胞术检测大鼠切牙细胞凋亡率和细胞增殖周期的变化,采用酶标仪检测Caspase-3和Caspase-8的活力.结果 随着NaF染毒浓度的升高,大鼠切牙细胞的凋亡率以及Caspase-3和caspase-8活力均呈明显的增高趋势(凋亡率:r=0.923 9,P<0.01;Caspase一3:r=0.966 6,P<0.01;Caspase-8:r=0.932 2,P<0.01).大鼠切牙细胞凋亡率与Caspase-3和caspase-8活力均呈显著的正相关(Caspase-3:r=0.798 3,P<0.05;caspase-8:r=0.975 3,P<0.01).与对照组比较,中浓度NaF染毒组大鼠切牙细胞G<,2>/M细胞构成比下降,高浓度NaF染毒组S期细胞构成比下降,差异均有统计学意义(P<0.05).各组大鼠切牙细胞G<,0>/G<,1>细胞构成比间比较,差异无统计学意义.各组大鼠切牙细胞DNA相对含量(DNA related content,DNA<,RC>)和细胞增殖指数(proliferation index,PI)间比较,差异均无统计学意义.结论 Caspase介导的细胞凋亡在氟斑牙形成过程中发挥重要作用.
