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2型糖尿病患者胰升糖素受体基因的PCR-DGGE扫查
目的探讨胰升糖素受体(GCG-R)基因在中国人2 型糖尿病遗传背景中的地位.方法运用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术对200例无亲缘关系之中国云南昆明地区汉族人(2型糖尿病患者12 0例,健康对照者80例)的GCG-R基因编码区进行了分子扫查.结果仅发现2例2型糖尿病患者及1例健康对照者的GCG-R基因第7外显子存在多态变异带型,这一杂合子多态变异基因型在2型糖尿病组和对照组中的发生频率分别为0.017和0.013,两者之间无显著性差异.此外,研究对象GCG-R基因其它编码区的PCR-DGGE扫查均未发现异常泳动片段.结论 GCG-R基因可能不是中国昆明地区汉族人2型糖尿病的主要致病基因.
关键词： 2型糖尿病 胰升糖素受体基因 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳 -
蔗糖浓度对牙菌斑生物膜细菌组成及pH值影响的体外实验
目的 研究不同蔗糖质量浓度对体外牙菌斑生物膜细菌组成和pH值的影响,探讨口腔微生物在蔗糖存在下的致龋能力.方法 采集有龋者(龋失补牙面数＞3)集合牙菌斑样本5例,混合后在不同质量浓度(0、1.5、3.0、5.0及20.0g/L)蔗糖中体外培养生物膜；对生物膜进行聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳分析和细菌量计数,并行pH值监测.结果 随着培养基中蔗糖质量浓度增加,生物膜细菌种类减少；随着蔗糖质量浓度的升高(0、1.5、3.0、5.0、20.0g/L),生物膜培养36 h后所能达到的低pH值呈降低趋势,分别为5.4、4.7、4.5、4.2及4.2；在有蔗糖时,终12 h生物膜培养达到pH小值约需6h,相比初12h(约需10 h)明显缩短；对生物膜细菌量进行单因素方差分析结果显示,在蔗糖质量浓度为5.0g/L时细菌量大,向下蔗糖质量浓度依次为3.0、20.0、1.5及0g/L,各组间相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论 蔗糖浓度可影响体外牙菌斑生物膜的细菌组成和pH值,含蔗糖的培养基可筛选出具有潜在强产酸和耐酸能力的菌群.
关键词： 蔗糖 龋病 氢离子浓度 生物膜 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳 -
种植体周围黏膜炎龈下微生物群落多样性研究
目的:检测种植体周围黏膜炎龈下微生物群落的多样性,研究种植体周围黏膜炎龈下微生物种类、数量以及群落分布,找出特异性微生物,为临床上选择适当的维护与干预方法提供依据.方法:采集10例患黏膜炎的种植体龈沟液样本(A组)及14例健康种植体的龈沟液样本(B组),提取样本龈沟液中的微生物总DNA作为模板,采用细菌的16S rDNA V3区通用引物进行扩增,扩增产物进行DGGE电泳分析及克隆测序分析.结果:A组较B组龈沟液量多,差异有显著统计学意义(P＜0.01).AB两组样本整体相似性为18％,A组各样本群落相似性为29.9％～60.2％,B组各样本相似性30.8％～74％.A组测得5种菌门,包括15种菌属,B组测得4种菌门,12种菌属.A组G-厌氧杆菌比例为69.65％,B组为64.51％.结论:发生种植体周围黏膜炎时龈沟液量较健康种植体增加,龈沟液量可一定程度上反映种植体周围软组织的健康状况.种植体周围组织在健康状态和发生黏膜炎时的龈沟液中微生物群落均具有高度多样性,但菌群结构差异较大.健康种植体及种植体周围黏膜炎龈下微生物群落均以G-厌氧杆菌为主,后者G-厌氧杆菌比例更高.
关键词： 种植体 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳 16S rDNA 微生物多样性 -
锦灯笼提取物对抗菌药物致小鼠肠道菌群失调的预防作用
目的:研究锦灯笼提取物对抗菌药物致小鼠肠道菌群失调的预防作用.方法:48只BALB/c小鼠随机均分为正常对照(等容生理盐水)组、模型(等容生理盐水)组、丽珠肠乐(2 mg/kg)组与锦灯笼提取物高、中、低剂量(80、40、20 mg/kg)组,灌胃给药,每天1次,连续7d.末次给药后第2天灌胃盐酸左氧氟沙星(1.3 mg/kg),每天1次,连续7d以致小鼠肠道菌群失调.收集小鼠粪便,提取基因组DNA,采用聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)法获得肠道菌群指纹图谱,进行相似性及优势条带的序列分析.结果:灌胃抗菌药物前,小鼠肠道优势菌型为内普雷沃氏菌和乳酸杆菌,高、中、低剂量锦灯笼提取物可增加其乳酸杆菌数量;灌胃抗菌药物后,高、中、低剂量锦灯笼提取物可促进模型小鼠肠道内拟杆菌的生长,使其成为优势菌型.结论:锦灯笼提取物能增加肠道乳酸杆菌的数量,对抗菌药物致小鼠肠道菌群失调有预防作用.
关键词： 锦灯笼 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳 肠道菌群 -
双生子儿童口腔微生物群组结构分析
目的：通过聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳（PCR-DGGE）分析双生子儿童中同卵双生子和异卵双生子口腔微生物群组结构的差异。方法选取双生子儿童20对，其中同卵双生子10对，异卵双生子10对；乳牙列10对，混合牙列10对；有龋者17人，无龋者23人。采集唾液样本后，提取细菌DNA，经通用引物扩增16srRNA基因和PCR-DGGE分析后，计算PCR-DGGE条带数及多样性指数。结果同卵双生子与异卵双生子均表现出明显的聚类分布，但同卵双生子与异卵双生子之间无统计学差异（P>0.05）。乳牙列组中，有龋儿童的PCR-DGGE条带数（11.00±1.56）及多样性指数（1.05±0.36）低于无龋儿童（14.00±2.74，1.44±0.37），两者间均具有统计学差异（P<0.05）。混合牙列组中，有龋儿童的PCR-DGGE条带数（11.88±4.05）及多样性指数（1.18±0.36）低于无龋儿童（14.31±5.71，1.28±0.47），但两者间均无统计学差异（P>0.05）。结论亲缘之间口腔微生物组群结构更为相似，环境的影响可能大于遗传的影响。有龋儿童的微生物种类较无龋儿童有所减少。
关键词： 聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳 双生子 口腔微生物群组
