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  • CARP编码蛋白的相互作用蛋白筛选

    作者:张震;刘宝华;石毅;张芊;惠汝太

    目的:筛选与CARP编码蛋白相互作用的蛋白,为其功能研究奠定基础. 方法: 将编码全长CARP的DNA序列插入到pGBKT7-BD载体中,转化AH109酵母,然后与含有已克隆到pACT2载体上的人心脏cDNA文库的Y187酵母融合.CARP与相应的人心脏cDNA片段编码的蛋白发生相互作用后,可激活报告基因的表达.阳性克隆的质粒进行测序分析.同源性检索搜寻GenBank中与之相同或相似的序列. 结果: 共筛选约3×107个cDNA,筛选出9个阳性克隆,其中包括FLNa(actin-binding protein-280). 结论: CARP编码蛋白在酵母中可以特异性的结合FLNa,提示CARP可能通过与FLNa相互作用参与调控细胞增殖

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