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Dnmt1,Dnmt3a,Dnmt3b和HMT在不同结肠癌细胞系的表达及意义
目的:探讨不同结肠癌细胞系中表观遗传学酶谱的表达水平.方法:RT-PCR分别检测结肠癌细胞系HT-29、Lovo和Caco-2中Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b和HMT mRNA表达水平.结果:Dnmt3b mRNA在结肠癌细胞系HT-29、Lovo中高度表达,Dnmt1与HMT次之,Dnmt3a表达水平低;Dnmt3b、Dnmt3a在不同结肠癌细胞系之间的表达水平存在显著的差异.结论:不同分化程度的结肠癌细胞系可能存在不同的表现遗传学发生机制;Dnmt3b在建立和维持结肠癌细胞系DNA甲基化模式中可能起更为重要的角色.
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TERT过表达对人骨髓间充质干细胞精氨酸组蛋白甲基化酶表达影响的研究
目的 探索端粒酶对间充质干细胞精氨酸组蛋白甲基化酶和组蛋白甲基化状态的影响.方法 利用逆转录病毒将端粒酶催化亚基转染到人骨髓间充质干细胞建立稳定转染细胞系,研究TERT过表达后对精氨酸组蛋白甲基化酶基因族的主要相关基因表达的影响.结果 人骨髓间充质干细胞转染端粒酶催化亚基后,精氨酸组蛋白甲基酶基因超家族中的9个基因PRMT1~9的表达明显下降,组蛋白甲基化水平整体降低.结论 TERT过表达抑制了骨髓间充质干细胞精氨酸组蛋白甲基酶的表达,从而可能抑制精氨酸组蛋白的甲基化,精氨酸组蛋白甲基化水平降低有利于间充质干细胞维持年轻的状态.
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热性惊厥患儿血清中表观遗传标志物的 表达及临床意义
目的 分析热性惊厥(FS)患儿血清中DNA甲基转移酶1、3A、3B(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)、组蛋白甲基转移酶EZH2(EZH2)及组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)的变化情况,探讨其在FS疾病中的临床意义.方法 选取60例FS患儿,其中包括30例单纯型FS(SFS)和30例复杂型FS(CFS).另选取30例正常健康体检儿童为正常对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测比较3组间3种酶基因和蛋白之间的表达水平变化.结果 ①SFS组和CFS组DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、EZH2、HDAC4基因表达均高于正常对照组,差异有统计学意义(<0.05);SFS组与CFS组之间比较,差异无统计学意义(>0.05).②SFS组和CFS组DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、EZH2、HDAC4蛋白表达水平均高于正常对照组,差异有统计学意义(<0.05);SFS组与CFS组之间比较,差异无统计学意义(>0.05).结论 SFS和CFS组患儿血清中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、EZH2和HDAC4基因及蛋白水平均呈现高表达模式,提示表观遗传修饰在FS中的发生发展过程中发挥着重要作用,为深入研究FS的致病机制及防治FS提供了实验依据.
