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高磷对大鼠甲状旁腺组织及原代培养细胞的刺激作用
目的 观察高磷刺激下,离体的大鼠甲状旁腺(PTG)组织和培养的原代甲状旁腺细胞的PTH分泌变化规律.方法 解剖显微镜下切取28只Wistar雌性大鼠的两侧甲状旁腺,分别行组织和原代细胞培养.应用组织学形态学、PTH检测对甲状旁腺组织及原代培养细胞进行鉴定,并观察PTH的分泌规律.甲状旁腺组织及原代培养细胞组各分为正常磷、正常钙组(TN,CN,Pi1.0mml/1,Ca 1.25mmol/L),高磷、正常钙组(TH,CH,Pi3.5mmol/L,Ca 1.25mmol/L).隔天换液,分别于培养0h、4h、12h、24h、48h、72h、5d、7d、9d留取培养上清液,检测iPTH.结果 本实验切取的人鼠甲状旁腺组织和培养的甲状旁腺细胞经组织形态学及iPTH检测证实.在正常磷、正常钙的培养液中,甲状旁腺组织和培养的原代甲状旁腺细胞PTH分泌曲线相似,均在48h达到分泌高峰.在高磷、正常钙的培养液中甲状旁腺细胞PTH分泌与正常磷、正常钙组同一时间比较,差异无统计学意义(P>0.05).培养的甲状旁腺组织在高磷刺激下,PTH水平明显升高,高达基础值的10倍以上(48h),除HO外,高磷、正常钙组(TH组)PTH与正常磷、正常钙组(TN组)同一时间比较差异均具彳丁统计学意义(P<0.001).结论 体外研究显示:高磷可以刺激甲状旁腺组织PTH分泌增加,而对分散的细胞无作用.进行高磷对甲状旁腺功能调节的体外研究,以选择甲状旁腺组织为宜,且时间选择在48h内.
关键词: 高磷 甲状旁腺细胞原代培养 甲状旁腺组织 甲状旁腺激素