首页 > 文献资料
-
α-鹅膏蕈碱诱导小鼠肝细胞凋亡的实验研究
目的探讨α-鹅膏蕈碱(α-amanitin AMA)是否可诱导在体小鼠肝细胞凋亡,以及可能的剂量依赖性效应和时间依赖性效应.方法 30只健康雄性昆明小白鼠被分为6组,每组5只. A组经腹腔注射生理盐,B,C,D组分别经腹腔注射AMA 0.8,1.2,2.0 μg/g(体重),观察终止时点为24 h,用于观察肝细胞凋亡剂量依赖性效应.E和F组经腹腔注射AMA 2.0 μg/g(体重).观察终止时点为16 h和36 h,与A和D组一起用于对凋亡的时间依赖性效应进行分析.采用光学显微镜、透射电镜、琼脂糖凝胶电泳技术和TUNEL法检测小鼠肝细胞是否存在凋亡以及凋亡的效应.结果实验组小鼠肝脏切片中均出现典型的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳呈现DNA"梯带",TUNEL检测可见细胞核着色呈棕黄色的凋亡细胞.从剂量依赖性效应分析,A～D组的肝细胞凋亡指数分别为1.08%,4.88%,7.36%和9.20%,差异具有显著性(P＜0.05).从时间依赖性效应分析,A,E,D和F组的肝细胞凋亡指数分别为1.08%,5.68%,9.20%和14.44%,差异具有显著性(P＜0.05).结论α-鹅膏蕈碱能诱导小鼠肝细胞凋亡,并且在一定剂量范围内具有剂量依赖性和时间依赖性效应,肝细胞凋亡率随剂量的增大和作用时间延长而增加.
-
α-鹅膏蕈碱与细胞凋亡
鹅膏菌毒素的研究已有100多年的历史,但直到50年代以后随着分离新技术的发展,才使鹅膏蕈碱以及毒理作用的研究达到较高的深度.鹅膏菌毒素按其氨基酸的组成和结构分为鹅膏毒环肽(amatoxins)、鬼笔毒环肽(phallotoxins)和毒伞肽(virotoxins)三类.其中α-鹅膏蕈碱是致死鹅膏菌属中毒的成分,它是一种含有几种特殊氨基酸的环八肽[1],作用于真核生物细胞时,能专一性的抑制真核生物的RNA多聚酶Ⅱ,阻止mRNA的延长,从而抑制细胞内转录和蛋白质合成,α-鹅膏蕈碱被肝细胞吸收后出现肝功能衰竭,当时的病理学研究表现为坏死性改变[2,3].但是,在近的一些研究过程中发现,α-鹅膏蕈碱对肝细胞的毒理作用可能存在第二种机制即导致肝细胞凋亡[4,5].
