您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
乳腺特异表达文献资料
-
乳腺高效表达人溶菌酶转基因小鼠的制备
目的研究自行构建的动物乳腺特异表达载体p205C3的表达特性. 方法将人溶菌酶(hLYZ) cDNA插入p205C3载体,用获得的基因构件注射小鼠受精卵,用PCR和Southern blot对出生鼠进行基因整合检测,用微球菌溶解试验和Western blot对表达产物进行鉴定. 结果共出生136只F0代小鼠,从中筛选出4只(1♀3♂)转基因整合阳性鼠,其中的1只母鼠不表达hLYZ,1只雄鼠的4只F1代母鼠乳汁中hLYZ的表达量分别为5、75、175和200μg/ml,纯合后的3只F3代母鼠乳汁中 hLYZ的表达量分别为526μg/ml、648μg/ml和750μg/ml,表达仅限于乳腺中,表达产物的相对分子质量与正常hLYZ相同. 结论 p205C3能驱动hLYZ cDNA在小鼠乳腺中特异和高效表达,可以用于动物乳腺生物反应器的研制.
-
人溶菌酶cDNA在COS-1细胞及小鼠乳腺的暂态表达
目的研究自行克隆的1.5kbhLYZ双链cDNA的表达特性.方法将此cDNA亚克隆人真核表达载体pcDNA3及乳腺特异表达载体p205C3,重组载体pcDNA3LYZ转染COS-1细胞,用间接免疫荧光法检测转染细胞中hLYZ cDNA的表达;重组载体p205C3LYZ注射哺乳期小鼠,用微球菌溶解试验和斑点杂交试验检测hLYZ cDNA在小鼠体内的表达.结果hLYZ cDNA在转染的COS-1细胞中得到了正确表达;小鼠体内表达并分泌到乳汁中的hLYZ达87μg/ml,且目的基因的表达具有较好的组织特异性.结论hLYZ cDNA可在COS-1细胞中有效表达,基因构件p205C3LYZ可以用于动物乳腺生物反应器研制.
