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CVB3腺病毒载体疫苗Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果
目的 构建重组腺病毒Ad/MDC-VP1,观察Ad/MDC-VP1与NA疫苗联合应用的免疫效果.方法 构建、包装重组腺病毒Ad/MDC-VP1并检测目的 蛋白的表达.BALB/c小鼠随机分为Ad/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VP1、pcDNA3/MDC-VPl+Ad/MDC-VP1和PBS 4组,肌肉注射免疫小鼠.用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3(CVB3)VP1 IgG和中和抗体滴度;CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性;用致死量CVB3攻击小鼠后,检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率.结果 成功构建并包装了重组腺病毒Ad/MDC-VP1,检测到目的 蛋白的表达.peDNA3/MDC-VP1+Ad/MDC-VP1组血清CVB3 VP1 IsG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤活性和对小鼠的保护率明显高于其他各组(P<0.05),血清病毒滴度低于其他各组(P<0.05).结论 Ad/MDC-VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答.
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探讨BCG初次免疫结核杆菌DNA疫苗加强免疫方案的效应
目的:探讨BCG初次免疫(BCG-prime), 结核杆菌共表达DNA疫苗加强免疫(DNA疫苗-boost)的策略对小鼠的免疫效果.方法:将BCG及结核杆菌重组DNA疫苗依次免疫小鼠, 通过检测CTL和NK细胞的杀伤活性和特异性淋巴细胞增殖, 以及小鼠血清抗体及细胞因子的水平, 观测BCG-prime、共表达结核杆菌Ag85A/GM- CSF DNA疫苗boost策略对小鼠的免疫效果.结果:采用prime-boost免疫策略组的小鼠CTL的杀伤活性明显增强、特异性淋巴细胞明显增殖、IFN-γ的水平明显增高, NK细胞杀伤活性与对照组相比也有一定提高, 但未超过BCG单独免疫效果.免疫小鼠血清特异性抗体的滴度超过单独DNA疫苗免疫组.结论:在采用BCG-prime-结核杆菌DNA疫苗boost免疫策略后, 能增强对小鼠的免疫效应, 尤其是Th1型细胞免疫反应增强明显, 为进一步在动物体内进行保护性效应试验的研究提供了实验依据.
关键词： 结核杆菌 抗原85A BCG DNA疫苗 Prime-boost免疫策略
