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  • 细菌伴侣蛋白Skp可通过C5a受体引起白细胞的趋化运动

    作者:施磊;柳斌;关海霞;徐学庆

    目的证明大肠杆菌伴侣蛋白Skp可以诱导单核细胞和分叶核白细胞(PMN)产生趋化运动.方法分离提纯Skp,并通过分子质量测定和氨基端的氨基酸测序予以证实.使用S19核糖体蛋白和C5a的合成模拟肽链,进行受体拈抗试验.使用Skp的合成模拟肽链进行体外趋化实验分析其对白细胞的趋化作用.结果Skp对单核细胞和PMN具有趋化活性.其作用于C5a受体,也通过两步结合机制使受体活化.并推测Skp分子结构中-Gln83-Asp84-Arg85-及-Ser58-Asp59-Arg60-序列为可能的第二受体结合位点.结论C5a受体作为白细胞的趋化因子受体迄今为止被证明是两个内源性化学介质:C5a和S19核糖蛋白二聚体的受体.在此基础上,我们首次证明了大肠杆菌的伴侣蛋白Skp是一种来源于大肠杆菌的趋化因子.

  • 细菌伴侣蛋白Skp引起白细胞趋化运动的体内实验研究

    作者:施磊;冯影

    目的 细菌伴侣蛋白(Seventeen-Kilodalton protein,Skp)可以作用于C5a受体引起白细胞的趋化作用.该研究的目的Skp在生物体内和体外实验一样可以引起白细胞的趋化运动,且是细菌提取掖中主要的白细胞趋化因子.方法 制备Skp的特异性抗体,进行免疫吸收实验,进而豚鼠体内实验,观察组织标本.结果 E.Coli提取液中主要的白细胞趋化活性来自于Skp.Skp提纯物注射后可在豚鼠皮内发生单核细胞和PMNs的大量浸润.结论 细菌体内的Skp可能与在细菌壁发生补体系统激活产生的C5a共同引起白细胞的趋化反应.对于革兰氏阴性病原菌的先天性免疫具有重要意义.

  • 细菌伴侣蛋白Skp对C5a受体的作用位点

    作者:施磊;徐学庆;李玉姝;关海霞

    目的Skp(Seventeen-Kilodalton protein)已被证明是C5a受体的两个内源性的化学配体:C5a和S19核糖体蛋白二聚体(RPS19 dimer)之外的第3个配体,通过C5a受体引起白细胞的趋化运动.该研究目的:阐明Skp如何与受体结合及与受体结合的位点.方法使用S19核糖体蛋白(RPS19)和C5a的合成模拟肽链,进行的受体拮抗试验.使用Skp的合成模拟肽链进行趋化运动分析试验.结果证明Skp与RPS19和C5a一样,结合于C5a受体的相同结合区域,且也通过两步结合机制使受体活化.并初步推测了Skp分子结构中可能的受体结合位点.结论C5a受体可以通过识别革兰氏阴性细菌蛋白,在先天性免疫方面起到重要的作用.

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