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原位冷冻保存文献资料
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人骨髓间充质干细胞原位冷冻保存方法的改进
本研究的目的是分离纯化、大量扩增人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSC).在细胞原位冻存后通过鉴定其生物学特性有无变化,以探讨这种原位冻存方法的可行性.采用常规方法体外分离培养并扩增骨髓MSC,将培养扩增的细胞用含10%二甲亚砜、30%胎牛血清、DMEM-LG的细胞冻存体系,以不同的细胞贴壁密度在细胞培养瓶内原位冻存于-70℃冰箱内.冻存后第4,8和12周在38℃至40℃的水浴中复苏冻存的贴壁细胞,通过细胞周期分析并检测其多向分化功能以鉴定该方法的可行性.结果表明,MSC不经消化,直接在培养瓶内原位冻存于-70℃低温冰箱,3个月内细胞生物学特性没有明显改变,细胞仍具有向成骨、脂肪和成软骨细胞多向分化的能力.结论:体外培养的骨髓MSC原位贴壁冻存于-70℃,至少在12周内不影响其生物学功能,此种短期冷冻保存是一种可行的方法.
