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三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯联合环磷酰胺对K562细胞株端粒-端粒酶系统的作用
本研究探索三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯单独及联合环磷酰胺应用对K562细胞株端粒长度和端粒酶活性的调节作用,探讨上述药物抗白血病的作用机制.用不同浓度的三氧化二砷、人参皂甙及β榄香烯单独及联合环磷酰胺与人类红白血病细胞株K562共培养,采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性、Southern杂交法检测端粒长度.观察上述药物对K562细胞端粒酶活性及端粒长度的影响.结果表明: ①经人参皂甙、三氧化二砷、β榄香烯及环磷酰胺作用后,K562细胞株端粒酶活性下降,下降程度呈浓度时间依赖性.当与环磷酰胺联合应用后,下降程度更明显.②三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯作用后K562细胞的存活率下降,且抑制作用呈浓度、时间依赖性.当与环磷酰胺联合应用后,抑制作用更明显.③三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及环磷酰胺作用于K562细胞株72小时后,端粒长度略有延长. 结论: 三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及环磷酰胺均能抑制K562细胞株的生长及端粒酶活性,抑制端粒酶活性可能是其抗肿瘤作用的机制之一;三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯与环磷酰胺联合应用后抑制作用增强;联合环磷酰胺可望降低上述药物的给药浓度. 抑制端粒酶活性后,K562细胞株的端粒长度略有延长,提示除了端粒酶以外,白血病细胞可能存在其他的端粒长度调节机制.
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三氧化二砷等中药联合CTX对K562细胞株端粒酶的抑制作用
目的研究三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及环磷酰胺(CTX)等几种药物,在不同浓度时对K562细胞株端粒酶活性的调节作用,研究上述中西药的作用机制,为寻求治疗急性白血病的中西药联合新方法提供参考.方法用3组不同浓度的三氧化二砷、人参皂甙、β榄香烯及CTX与人红白血病细胞株K562共同培养,分别于作用24、48、72 h后收集细胞并采用PCR-ELISA法检测K562细胞端粒酶活性.结果①人参皂甙、三氧化二砷、β榄香烯及CTX作用后,K562细胞株端粒酶活性下降,下降程度呈浓度时间依赖性,在一定浓度及作用时间后端粒酶呈阴性.当三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯与CTX联合应用时,对端粒酶活性的抑制作用增强.②上述药物作用后K562细胞的存活率下降,且抑制作用呈浓度、时间依赖性.当三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯与CTX联合应用时,抑制作用增强.结论①三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯及CTX均能完全抑制K562细胞株的端粒酶活性,抑制端粒酶活性可能是其抗肿瘤作用的机制之一.当三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯与CTX联合应用时,对端粒酶活性的抑制作用被增强.②上述药物能抑制K562细胞的生长,当三氧化二砷、人参皂甙、β-榄香烯与CTX联合应用时,抑制作用增强.
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β榄香烯对肝星状细胞分泌ANGⅡ及表达AT1R mRNA的影响
目的 为肝纤维化的治疗提供新思路.方法 将肝星状细胞(HSC)-T6细胞株培养24 h,分别以质量浓度为10.0、5.0、2.5mg/L的β榄香烯(实验1、2、3组)作用4、12、24 h,收集细胞上清及细胞,并设空白对照组.放射免疫法检测培养上清中血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ)水平,RT-PCR检测ANGⅡ的Ⅰ型受体(AT1R)mRNA表达.结果 作用12、24 h时各实验组ANGⅡ水平及均较空白对照组降低(P<0.05、0.01);三个时间点各实验组AT1R mRNA表达均显著低于空白对照组(P<0.01),并呈剂量依赖性.结论 β榄香烯可能延缓肝纤维化的发生、发展.
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β榄香烯对肾小球系膜细胞纤维化的抑制作用
目的 观察β榄香烯对转化生长因子(TGF-β)刺激后的肾小球系膜细胞(HMC)表达结缔组织生长因子(CTGF)及纤维连接蛋白(FN)的影响.方法 先用有效浓度10 ng/mL的转化生长因子(TGF-β)刺激肾小球系膜细胞(HMC)24 h,然后再用不同浓度,分别为80μg/mL、120μg/mL、160μg/mL的榄香烯干预被刺激的肾小球系膜细胞( HMC )24h.实验分高中低不同浓度组、诱导组及空白对照组.用Western蛋白印迹法测定FN蛋白表达和CTGF的蛋白表达.用RT-PCR法检测FN和CTGF的mRNA水平的变化.结果 经TGF-β刺激24 h后的肾小球系膜细胞(HMC),诱导组较空白组比较,FN蛋白和CTGF蛋白的表达能明显(P＜0.05),高浓度β榄香烯组和中浓度β榄香烯组较诱导组比较,HMC上的FN蛋白和CTGF蛋白的表达和mRNA水平明显降低(P＜0.05),并呈浓度依赖方式降低MHC上表达的FN和CTGF的表达.结论 β榄香烯可以通过减少诱导纤维化后的肾小球系膜细胞中CTGF和FN的表达,发挥抑制肾间质纤维化的作用,β榄香烯可以抑制肾间质纤维化,在延缓肾功能衰竭过程中起着重要作用.
