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B7-H1在人骨髓间充质干细胞上的表达及其对T淋巴细胞增殖的影响
目前关于人骨髓间充质干细胞(hBMMSC)的免疫调节机制尚不完全清楚.为探讨B7-H1在hBMSC上的表达水平及hBMMSC的免疫调节机制是否与B7-H1介导的信号通路(B7-H1/PD-1)有关,首先分离、培养、鉴定hBMMSC,采用流式细胞术、RT-PCR、Western-blot检测B7-H1在hBMMSC上的表达水平.进一步采用混合淋巴细胞培养法(MLC)观察hBMMSC对T淋巴细胞增殖的抑制作用,然后使用功能级的抗B7-H1单克隆抗体阻断B7-H1,用CCK-8试剂盒检测阻断前后T淋巴细胞增殖活性.结果表明:hBMMSC高表达B7-H1分子;表达B7-H1的hBMMSC能有效地抑制T淋巴细胞的增殖,其抑制作用与hBMMSC数量呈剂量依赖性;使用抗B7-H1单克隆抗体阻断B7-H1后hBMMSC对T淋巴细胞增殖的抑制作用显著降低,抑制率由64.1%降低至38.75%.结论:B7-H1在hBMMSC上高表达,B7-H1介导的信号通路(B7-H1/PD-1)参与了hBMMSC的免疫调节作用.
关键词： 骨髓间充质干细胞 免疫调节 B7-H1 B7-H1/PD-1信号通路 -
口腔扁平苔藓外周血T细胞B7-H1/PD-1信号的表达及其作用
目的 通过检测口腔扁平苔藓(OLP)患者外周血T细胞中程序性死亡因子1(PD-1)及其配体B7同系物1(B7-H1)表达水平的变化,探讨其临床意义,并观察在阻断B7-H1/PD-1信号通道后对T细胞增殖及细胞因子分泌的影响,探讨其与OLP发生发展的关系.方法 选择2014年1月至2017年1月300例OLP患者(OLP组)和300例健康成人(对照组)作为研究对象.应用网纹-萎缩-糜烂(RAE)计分系统评估OLP患者的疾病状态.采用密度梯度离心法分离外周血中的单个核细胞,采用流式细胞仪检测T细胞上B7-H1和PD-1的表达水平.酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中γ-干扰素(IFN-γ)、白介素(IL)-2、IL-4、IL-10和可溶性PD-1(sPD-1)水平.贴壁法去除单核细胞后,将OLP患者的淋巴细胞与健康成人淋巴细胞混合培养,分别加入抗B7-H1单克隆抗体(anti-B7-H1mAb)及抗PD-1单克隆抗体(anti-PD-1 mAb)阻断B7-H1/PD-1信号通道,观察其对T细胞增殖及细胞因子分泌的影响.结果 OLP组患者外周血T细胞上B7-H1及PD-1的表达水平显著高于对照组(P均＜0.01).OLP组患者外周血T细胞上B7-H1的表达水平与RAE计分呈正相关性(r=0.510,P＜0.01),而PD-1的表达与RAE计分系统无相关性(r =0.041,P＞0.05).OLP组患者血清中Th1细胞因子IFN-γ、IL-2水平显著高于对照组(P均＜0.01);Th2细胞因子IL-4、IL-10水平显著低于对照组(P均＜0.01).OLP组和对照组患者血清中sPD-1水平无统计学差异(P＞0.05).应用anti-B7-H1 mAb及anti-PD-1 mAb阻断B7-H1/PD-1信号通路后,T细胞的增殖程度明显高于阻断前OLP组(P＜0.05),IFN-γ和IL-2的分泌较阻断前OLP组也显著增加(P均＜0.05,P＜0.01),表明B7-H1/PD-1信号途径可抑制OLP T细胞的增殖及IFN-γ和IL-2的分泌.结论 OLP患者外周血T细胞B7-H1/PD-1的异常表达可能通过负性调控OLP患者T细胞增殖及细胞因子分泌影响OLP的发生发展,OLP外周血T细胞上B7-H1的表达水平可用来监测疾病的严重程度.
