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共刺激信号系统文献资料
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编码人B7-2胞外区cDNA的克隆、表达及生物活性鉴定
B7-2分子是共刺激信号系统B7/CD28/CTLA-4中的重要成员之一,为了更深入地探讨B7-2分子在调控T细胞增殖、分化及相关信号传导过程中的作用,本研究通过聚合酶链式反应(PCR)扩增编码人B7-2分子胞外区的cDNA,测序后定向插入多个原核表达载体并诱导目的蛋白表达,用Western印迹和MTT鉴定生物活性.结果表明:通过pGEX-4T-2载体实现了在宿主菌BL-21(DE3)-codenplUs-RIL中较高水平的表达,蛋白表达量为20%.经Western印迹和MTT鉴定,所表达及初步纯化的B7-2胞外区重组蛋白能与抗人B7-2单抗发生特异性结合;在抗人CD3单抗的协同下,B7-2胞外区重组蛋白能有效地促进外周血单核细胞的增殖.结论:B7-2胞外区重组蛋白的获得为进一步研究B7-2分子结构与功能的关系奠定了基础.
