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急性早幼粒细胞白血病患者中TCR Vβ T细胞体内外克隆性增殖的比较
为了解急性早幼粒细胞白血病(APL)患者T细胞在体内或体外经诱导后TCR Vβ亚家族的分布和克隆性增殖特点,利用T淋巴细胞液体培养法,在rhIL-2和抗CD3单抗条件下诱导扩增APL患者单个核细胞,并应用RT-PCR分别扩增培养前后患者T细胞的TCR Vβ 24个亚家族基因的互补决定区3(CDR3)片段,了解各Vβ亚家族的表达情况;对阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度,了解T细胞克隆性.结果发现,APL患者T细胞仅表达部分Vβ亚家族,但经体外培养后可检测到部分新增TCR Vβ亚家族T细胞.全部患者存在某些TCR Vβ亚家族的克隆性增殖T细胞.2例患者均出现相似的Vβ1,Vβ3,Vβ7,Vβ16和Vβ20 T细胞的克隆性增殖情况.结论:T细胞的体外培养可诱导某些Vβ亚家族的表达.在T细胞培养不同时间中,呈持续克隆性增殖的TCR Vβ亚家族T细胞可能是患者T细胞对APL白血病细胞相关抗原的特异性免疫应答.
关键词： 急性早幼粒细胞白血病 T细胞受体Vβ基因 T细胞培养 克隆性增殖 -
抗CML特异性T细胞的诱导和细胞毒作用分析
0 引言特异性抗白血病免疫应答,而应用于开展白血病患者的特异性过继性免疫治疗,清除微小残留病变一直是众多研究人员的研究目标.本研究应用混合淋巴细胞肿瘤细胞培养(MLTC)和LDH方法分析CML细胞诱导自体和异体T细胞的特异性细胞毒活性作用,为特异性免疫治疗提供基础资料.
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AML-M5细胞诱导TCR Vβ T 细胞克隆性增殖研究
目的了解急性髓细胞白血病(AML)M5亚型细胞诱导T细胞的TCR Vβ亚家族限制性利用和克隆性增殖情况.方法采用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养(MLTC)方法,用AML-M5细胞体外诱导供者外周血和脐血的T细胞增殖,用RT-PCR扩增经MLTC前后获得细胞的24个TCR Vβ亚家族基因的互补决定区(CDR3),了解病人各Vβ亚家族的利用情况.并经基因扫描分析确定M5细胞诱导的T细胞克隆性特点.结果脐血和供者外周血分别表达13和5个TCR Vβ亚家族T细胞,经MLTC培养初期,则表达全部24个Vβ亚家族,随着诱导时间的增加,诱导T细胞所表达的Vβ亚家族逐渐减少.基因扫描显示AML-M5细胞诱导后的T细胞出现寡克隆和双克隆增殖改变,主要为Vβ21的克隆性增殖T细胞.结论 AML-M5细胞可诱导TCR Vβ T细胞克隆性增殖,这可能是对AML-M5细胞相关抗原的特异细胞免疫应答的结果.
