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修饰稳定性文献资料
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糖基化修饰血小板冷藏稳定性研究
本研究旨在观察尿苷二磷酸半乳糖(UDP-Gal)糖基化修饰人血小板的稳定性、理化指标及体外功能变化.实验分为室温对照组、冷藏对照组以及修饰组(U+4组和4+U组).机采人浓缩血小板悬液,4℃保存前或后添加适量UDP-Gal,进行糖基化修饰,分别于0、1、3、5、7、14天,通过荧光标记识别血小板膜糖蛋白末端半乳糖残基的凝集素(FTTC-RCA Ⅰ)检测糖基化修饰效果;pH计检测血小板悬液pH值;血细胞计数仪检测血小板平均体积;比浊法测定血小板聚集率;流式细胞术检测血小板活化标志CD62P、血小板膜蛋白CD42b及PS的表达.结果表明:保存14天时,修饰组血小板RCA Ⅰ结合率是室温组的5-6倍;修饰组血小板悬液pH低于室温组,但二者之间无显著性差异(p>0.05);保存14天时室温组和修饰组血小板平均体积分别为10.6±1.9 fL和11.14±1.1 fL,二者之间无显著性差异(p>0.05);各组体外聚集活性在保存过程中均逐渐下降,但修饰组优于室温组(p<0.05);流式检测结果显示,保存1-5天修饰组CD52P、CD42b和PS表达的阳性率与新鲜血小板无显著性差异(p>0.05),但保存14天时,CD62P和PS表达的阳性率升高,CD142b表达的阳性率降低,与新鲜血小板相比差异极显著(p<0.01).结论:在修饰血小板保存过程中,糖基化修饰的效果稳定,修饰血小板的pH和平均体积均处于正常值范围之内,聚集活性良好,优于室温保存组,但在保存5天后表现出不同程度的活化.
