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小鼠模型中伯氏疏螺旋体组织载量的定量研究
目的 用实时荧光定量PCR确定伯氏疏螺旋体感染小鼠模型不同组织的病原体载量.方法 培养低传代伯氏疏螺旋体至对数生长期,稀释为1×105/ml.为建立伯氏疏螺旋体感染小鼠模型,于每只小鼠皮内注射菌液100μl,在证实感染成功后,于第12天和第18天分别取不同组织,提取总DNA,用实时荧光定量PCR分别测定组织中的螺旋体flaB基因拷贝数,并标准化为每106β-肌动蛋白所对应flaB拷贝数(螺旋体数).对不同组织的螺旋体载量进行统计学处理,确定不同组织螺旋体载量差异是否有统计学意义.结果 在所检测的4种代表性组织中,膀胱螺旋体载量在两个典型时间点均高,皮肤和关节次之,心脏低.结论 伯氏疏螺旋体感染小鼠后,不同组织螺旋体载量差异有统计学意义.组织螺旋体载量与组织损伤程度无密切关系.
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颈段食管癌患者外周血单个核细胞HLA-A和HLA-B mRNA的表达
目的 检测颈段食管癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)HLA-A和HLA-B mR-NA的表达水平,探讨其在肿瘤免疫中的作用及其临床应用价值.方法 收集32例颈段食管癌患者和45名健康体检者外周血单个核细胞,用实时荧光RT-PER方法检测淋巴细胞HLA-A和HLA-B mRNA的表达水平.结果 PBMC的HLA-A和HLA-B mRNA在颈段食管肿瘤组的相对表达率分别为0.41±0.26和0.37±0.28,在正常对照组分别为1.12±0.54,1.19±0.60,颈段食管肿瘤组HLA-A和HLA-B mRNA相对表达率低于正常对照组(P均<0.000 1).多因素Logistic回归分析显示,HLA-A,B mRNA的表达与颈段食管癌的发生有关(P=0.01).结论 颈段食管癌患者外周血单个核细胞HLA-A和HLA-B mRNA表达水平低于正常对照组.HLA-A和HLA-B mRNA的表达水平或许可以作为一个新的肿瘤标志物,这对颈段食管癌的早期诊断和治疗提供了一个新的思路和方向.
