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时间分辨荧光检测分析文献资料
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恶性疟与间日疟双标记时间分辨免疫荧光检测试剂盒的研制
目的 采用双标记时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术研制一种同时检测恶性疟原虫、间日疟原虫及混合感染试剂盒,并评价试剂盒各项性能指标. 方法 用抗恶性疟原虫/间日疟原虫乳酸脱氢酶(PLDH)抗体1H12作为捕获抗体包被96孔板,以Sm3+标记抗恶性疟原虫乳酸脱氢酶(PfLDH)抗体2A5和Eu3+标记抗间日疟原虫乳酸脱氢酶(PvLDH)抗体4F6作为检测抗体,建立恶性疟与间日疟双标记时间分辨荧光分析法. 结果 试剂盒检测恶性疟原虫的灵敏度为0.15 ng/ml,线性范围为0.5～500 ng/ml,平均稀释回收率为102.2％,批内与批间变异系数分别为6.48％和6.63％;检测间日疟原虫的灵敏度为0.25 ng/ml,线性范围为0.5～500 ng/ml,平均稀释回收率为100.78％,批内与批间变异系数分别为5.39％和6.16％,恶性疟与间日疟检测不相互干扰.用自制试剂盒检测212份疟疾患者血标本,阳性率为95.28％,高于镜检法的92.45％和Optimal法的51.89％. 结论 PfLDH/PvLDH-TRFIA试剂盒能同时检测恶性疟、间日疟及二者混合感染,且灵敏度高,可测范围宽,稳定性好,具有良好应用前景.
关键词： 恶性疟 间日疟 乳酸脱氢酶 时间分辨荧光检测分析
