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成熟miRNA文献资料
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半巢式荧光定量PCR快速检测登革Ⅰ型病毒成熟microRNA方法的建立
目的 建立外周血中登革病毒微小RNA检测方法,探讨其作为登革热病毒感染生物标记物的可行性. 方法 设计并筛选半巢式实时荧光定量PCR检测登革病毒miRNA引物,验证方法的灵敏度、特异性和重复性. 结果 设计的登革病毒茎环引物和扩增引物可区分健康人和登革热I型感染者;重复试验确定Ct≤35为登革病毒感染阳性,Ct＞35为阴性,同一样品内相对标准偏差(RSD)为0.05％,样品间的相对标准偏差(RSD)为0.15％,总体样品的相对标准偏差(RSD)为5％;该方法检测miRNA的灵敏度为1×10-7tmol/L,检测1～10-4μmol/L内的miRNA呈良好的线性关系.该方法也显示了较好的特异性. 结论 成功建立了半巢式SYBR Green工荧光定量qRT-PCR检测工型DENV的miRNA方法.外周血中成熟的miRNA可以作为一种潜在的DENV感染生物标志物.
