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云南省广州管圆线虫宿主分布及感染情况调查
目的 为了解云南省广州管圆线虫感染情况及分布特点. 方法 从野外、集贸市场等场所采集螺类、蛞蝓、鱼虾用肺检法和组织均浆化法检查中间宿主、转续宿主体内广州管圆线虫幼虫;解剖检查野鼠心肺广州管圆线虫成虫.结果 18县(市)从野外、集贸市场捕获福寿螺;在景洪、勐腊、瑞丽、陇川、大理和洱源等6个县(市)捕获的福寿螺中发现感染广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫,其感染率分别为0.47％(3/633)、1.96％(10/510)、3.70％(23/622)、1.02％(2/197)、1.17％(16/1369)和1,38％(2/145);11县从野外捕获中华圆田螺、2县从野外捕获铜锈环棱螺,3县从野外捕获蛞蝓,检查未发现广州管圆线虫幼虫.瑞丽、大理和景洪等3个县集贸市场销售的福寿螺中广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫感染率分别为19.56％(18/92)、7.25％(9/124)和2％(2/100).野外和农贸市场销售的中华圆田螺、铜锈环棱螺等螺类均未检出广州管圆线虫幼虫.5县解剖褐家鼠和黄胸鼠39只,仅在1只鼠肺动脉中获2条广州管圆线虫成虫. 结论 云南省有福寿螺自然生长繁殖,并感染广州管圆线虫第Ⅲ期幼虫.
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上海市广州管圆线虫中间宿主螺类分布及感染现状抽样调查
目的 调查上海市广州管圆线虫中间宿主螺类的种类、分布和感染现状. 方法 于2012年8月-2014年10月,在上海市嘉定、青浦、普陀、宝山、杨浦、闵行、松江、金山、崇明和浦东新区等10个区县现场开展了广州管圆线虫中间宿主螺类的调查.采用肺检法和匀浆法剖检采集的螺类,计算感染率. 结果 共采集螺类标本1 074只,经形态学鉴定,隶属于8科10种,其中小管福寿螺133只、褐云玛瑙螺25只、中国圆田螺183只、铜锈环棱螺78只、尖膀胱螺349只、椭圆萝卜螺224只、同型巴蜗牛45只、中华灰巴蜗牛32只、黄蛞蝓2只和双线嗜黏液蛞蝓3只.其中褐云玛瑙螺为市场销售,野外未见分布;而小管福寿螺在青浦区金泽镇发现野外自然种群.病原学检测未发现感染广州管圆线虫的螺类. 结论 上海地区未发现广州管圆线虫感染螺类,但对小管福寿螺应加强相应的监测工作.
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广东省广州管圆线虫病疫源地调查
目的 了解广东省广州管圆线虫病疫源地分布情况,为制定监测方案提供依据.方法 按不同地理位置分层抽样,分别抽取粤东、粤西、粤北山区和珠江三角洲4个地区共22个县(市、区),每县(市、区)随机抽取1～2个行政村(区)作为调查点.用匀浆法或肺检法剖检在野外现场采集的部分小管福寿螺(Pomacea canaliculata)和褐云玛瑙螺(Achatina fulica),以及餐饮、集市采集的不同品种的淡水螺和陆生螺,调查广州管圆线虫(Angiostrongylus cantonen-sis)Ⅲ期幼虫感染情况.现场捕捉鼠类,鉴别种类后解剖心肺组织,检查感染情况;采集新鲜鼠粪,用清水沉淀法检查幼虫.结果 22个调查县(市、区)均有小管福寿螺分布,且数量众多;广宁县未开展褐云玛瑙螺调查,和平县、曲江区和翁源县未采集到褐云玛瑙螺,其他调查点均有该螺分布.22个调查县(市、区)共采集小管福寿螺3754只,褐云玛瑙螺1465只,平均感染率分别为5.9%(172/2929)和16.5%(223/1354),两者差异有统计学意义(P<0.01).粤东、粤西、粤北山区和珠江三角洲的受检螺平均感染率有地区差异(P<0.01),珠江三角洲高(15.6%,152/975),其中又以东莞市的受检螺平均感染率高(34.7%,78,225).在9个调查县(市、区)的农贸市场采集圆田螺(Cipangopaludina)114只和环棱螺(Bellamya)541只,罗定市和开平市的环棱螺中幼虫阳性率分别为1.4%(1/70)和3.3%(3/91).在9个调查县(市、区)捕获褐家鼠(Rattus norvegicus)、黄胸鼠(R.flavipectus)、(鼠句)鼱(Suncus murinus)、小家鼠(Mus mus-culus)、大板齿鼠(Bandicota indica)、黄毛鼠(R.losea)和黑家鼠(R.rattus)等共491只,平均感染率为11.4%(56/491),其中褐家鼠、黄胸鼠和板齿鼠的平均感染率分别为19.8%(52/263),2.5%(3,118)和10.0%(1/10),其他4种鼠类中均未发现有广州管圆线虫感染.在7个调查县(市、区)采集到新鲜鼠粪34份,I期幼虫阳性率为44.1%(15/34).结论 广东省广州管圆线虫病疫源地分布广泛,中间宿主和终末宿主均有不同程度感染.
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我国广州管圆线虫自然疫源地分布首次调查
目的 调查我国广州管圆线虫自然疫源地的分布.方法 运用地理信息系统(GIS)技术,借用主要中间宿主螺类有效累积温度模型参数,预测和绘制我国主要中间宿主螺类及广州管圆线虫在我国的潜在分布地图.根据绘制的预测地图,以区域抽样法,按栅格总数5%比例进行随机抽样.随机抽取55个调查点于2006年9～10月开展主要中间宿主分布及感染率调查.结果 我国大陆潜在分布小管福寿螺的有19个省(市、区),其中福建、江西、浙江、湖南、广东、广西、海南和云南等8个省(区)已证实有小管福寿螺自然分布.福建、江西、浙江、湖南、广东、广西和海南等7个省(区)有广州管圆线虫自然感染,其中,福建建瓯、江西兴国、浙江瑞安、湖南汝城、广东化州、广西上思和海南五指山等地的小管福寿螺自然感染率较高,分别为36.6%、19.9%、16.0%、5.0%、6.3%、39.1%和25.0%.结论证实小管福寿螺自然感染有广州管圆线虫的7个省(区)均存在广州管圆线虫自然疫源地.
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云南省临沧市小管福寿螺COⅠ基因多态性分析
目的 通过对云南省临沧市小管福寿螺(Pomacea canaliculata)COⅠ基因的遗传标记分析,了解当地小管福寿螺基因多态性,为云南省后续开展广州管圆线虫病监测提供科学依据.方法 对采自云南省临沧市孟定镇38份小管福寿螺样本进行COⅠ基因扩增,并将PCR产物测序.运用MEGA 6.06软件Kimura-2参数模型,对来自于GenBank的福寿螺单倍型与本研究获得单倍型一起进行系统进化树构建和个体间遗传距离计算,分析其遗传多样性.结果 共获得31条序列,分属3种单倍型(Haplotype1~Haplotype3),其中Haplotype1的频率较高,占整个样本的83.9%(26/31).3种单倍型与小管福寿螺的遗传距离小,为0~0.052;而与Pila conica的遗传距离大,为0.021~0.239.进一步进化分析表明,3种单倍型均为小管福寿螺,与来自日本熊本(GenBank登录号:AB 433769)、中国香港(GenBank登录号:KT 313034)和美国夏威夷(GenBank登录号:EU 523129)的小管福寿螺序列聚成一大支,具有较近的亲缘关系;而与P.insularum (GenBank登录号:EF 514942)、P.camena(GenBank登录号:EF 515059)等序列的亲缘关系较远.结论 云南省临沧市存在小管福寿螺,本研究获得的3种单倍型之间存在较大的遗传分化.
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提纯小管福寿螺DNA6种方法的比较研究
目的 以不同方法提纯小管福寿螺DNA, 用PCR检测以比较其效果.方法 将80只野外采集的小管福寿螺分8组,取出肺囊并剪碎后分别用QIAGEN、天根、OMEGA的基因组DNA抽提试剂盒,及异硫酸氰胍抽提法、树脂抽提法和树脂-二氧化硅抽提法提纯小管福寿螺基因组DNA,用PCR扩增福寿螺16s rDNA,测定目的 条带相对浓度以评价各方法的抽提效果.结果 各种方法提纯的基因组DNA均能用PCR扩增方法扩增出目的 条带,但目的 条带浓度有一定差异.其中,QIAGEN公司和OMEGA公司的抽提试剂盒、树脂抽提法和树脂-二氧化硅抽提法提纯的模板PCR扩增量较高,与其余4种抽提方法比较有统计学意义.试剂盒抽提法的单价成本是手工抽提法的8.4～57.1倍.结论 QIAGEN和OMEGA公司的基因组DNA抽提试剂盒的提纯效果好,但成本较高,适用于少量样本的抽提.树脂抽提法和树脂-二氧化硅抽提法从提纯效果、成本等方面评价,较适用于大量样本抽提处理工作.异硫酸氰胍抽提法,抽提快,成本低但所用试剂对身体有毒害,较适用于大量样本或应急样本的处理.
