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衣原体分泌蛋白的研究进展
衣原体通过其自身产生的分泌蛋白实现与宿主的相互作用,此类蛋白主要包括分泌到包涵体膜上(如包涵体膜蛋白等)、分泌到胞浆中(如CPAF、TARP等)及其他分泌蛋白(SINC).近年来出现了关于不同类型分泌性蛋白的新研究成果,本综述主要对这些分泌性蛋白的一些新功能进行了论述.
关键词： 衣原体分泌蛋白 包涵体膜蛋白 衣原体蛋白酶体样活性相关的因子 TARP 综述 -
衣原体包涵体膜蛋白研究现状
衣原体包涵体膜蛋白是衣原体基因编码、表达定位于包涵体膜上的蛋白质,在衣原体的包涵体内复制、营养摄取及信号转换等方面发挥重要作用.包涵体膜蛋白的发现大致来自于4种途径即Ⅲ型分泌系统的研究、宿主抗衣原体免疫应答中抗原处理、计算机自动检索分析和血清学检测方法,但终鉴定都依赖于血清学方法.对包涵体膜蛋白的研究近年来一直是衣原体研究的重点,随着更多的包涵体膜蛋白被鉴定,对其功能的研究将有助于揭示衣原体的致病机理以及衣原体感染的诊断和疫苗研发,本文就有关研究报道予以综述.
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神经退行性疾病潜在致病肺炎衣原体蛋白Cpn0147酵母双杂交诱饵载体的构建
目的：构建Cpn0147酵母双杂交诱饵载体，为应用酵母双杂交系统筛选与其相互作用的蛋白奠定基础。方法：应用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）扩增技术获得Cpn0147基因片段，克隆入pGBKT7载体，鉴定构建是否成功，确定构建成功后将重组载体pGBKT7-Cpn0147转入AH109及Y187酵母中，进行诱饵载体的毒性及自激活活性分析。结果：Cpn0147诱饵载体构建成功，且该诱饵载体无自激活活性，对两种宿主酵母细胞无毒性。结论：诱饵载体pGBKT7-Cpn0147可用于酵母双杂交系统，为进一步筛选与之相互作用蛋白提供了实验基础。
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肺炎衣原体包涵体膜蛋白Cpn0147抗原性分析
目的:在大肠杆菌中表达纯化融合蛋白GST-Cpn0147,研究其免疫原性.方法:将Cpn0147基因克隆到原核表达载体PGEX-6P2,转化入大肠杆菌XL-Blue,经IPTG诱导表达并纯化;以纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备免疫血清,ELISA法证实其免疫原性并检测免疫血清的效价,Western-blot检测免疫反应性.结果:在大肠杆菌中表达了GST-Cpn0147融合蛋白,以该蛋白免疫小鼠获得了免疫血清.结论:获得了GST-Cpn0147融合蛋白,并证实其具有免疫原性和免疫反应性.
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沙眼衣原体包涵体膜蛋白的研究进展
沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)是一种专性细胞内寄生的革兰阴性病原体,在宿主细胞内增殖形成包涵体,通过包涵体与宿主细胞发生相互作用.包涵体膜蛋白(inclusion membrane proteins,Inc蛋白)是一类定位于衣原体包涵体膜上的含独特双叶片状疏水性基序结构的衣原体蛋白.Inc蛋白广泛存在于衣原体属各个种内,每种衣原体既有各自独特的Inc蛋白,又有其关键Inc蛋白同系物,基于生物信息学方法,预测Ct有59个Inc蛋白.Inc蛋白在衣原体与宿主细胞相互作用过程中发挥重要作用.在过去的十年内,鉴定Inc蛋白并对其功能进行研究受到了重视,但对于Inc蛋白的功能仍知之甚少.衣原体基因操控技术的应用,推动了Inc蛋白等衣原体单个蛋白的功能研究.现就Ct Inc蛋白的鉴定及其功能研究进展作一概述.
