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新型结核病疫苗融合菌株制备及其免疫学特性的研究
目的 观察由卡介苗(BCG)与结核分枝杆菌国际标准弱毒株H37Ra(H37Ra菌株)构建的融合菌株(B/R菌株)生长特性及其在免疫小鼠体内的生长情况. 方法 分别测定用7H9培养基培养3、6、9、12、15、18、21、24、27和30d的B/R菌株、BCG和H37Ra菌液在波长600 nm处的A值,以时间为横坐标,A600值为纵坐标,绘制细菌生长曲线.将C57BL/6小鼠随机分为B/R菌株、BCG和H37Ra菌株3组,每组30只,分别皮下接种B/R、BCG和H37Ra菌液0.1ml(含活菌数为1.0×106个),免疫15、30、45、60和75 d后无菌条件下取小鼠肝脏、脾脏和肺脏,制成脏器组织匀浆,接种罗氏固体培养基斜面,培养20 d后计数各脏器菌落数(Log10cfu). 结果 细菌生长曲线显示,B/R菌株的适应调整期较长,6d后进入生长对数期,27 d后进入稳定期,生长周期约30 d左右.免疫15、30、45、60和75 d小鼠肝脏、脾脏、肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组高于BCG和H37Ra菌株组.小鼠肝脏定植细菌数(Log10cfu) B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P＞0.05);免疫15、60及75 d小鼠脾脏定植细菌数(Log 10cfu)B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P＜0.05),免疫30和45 d小鼠脾脏定植细菌数(Log1 0cfu) B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P＞0.05);免疫15和45 d小鼠肺脏定植的细菌数(Log10cfu) B/R菌株组与BCG和H37Ra菌株组比较差异有统计学意义(P＜0.05),免疫30、60和75d小鼠肺脏定植细菌数(Log10cfu)B/R菌株组与BCG组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与H37Ra菌株组比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 B/R菌株的生长周期为30 d,在小鼠体内至少存活2个月,定植能力较强.
