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用PCR诊断不同虫荷量的大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的价值
目的评价在不同虫荷量条件下用PCR诊断大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的价值.方法将PCP大鼠随机分为药物治疗组及未治疗组,测定其肺虫荷量,收集其支气管灌洗液(BALF)和血清标本,用PCR和半套式(Sn)PCR检测标本中的卡氏肺孢子虫基因,比较PCR和环六亚甲基四胺银(GMS)染色结果,及与病鼠肺虫荷量的关系.结果虫荷量高的未治疗组病鼠的BALF标本PCR、Sn PCR及GMS染色阳性率分别为100%、100%和92.6%,差异无显著性(P>0.05);而虫荷量低的治疗组的PCR(88.1%)、Sn PCR(94.9%)阳性率均显著高于GMS染色镜检阳性率(30.5%)(P<0.05).肺虫荷量>500个/mg肺的PCP大鼠,血清PCR阳性率显著高于≤500者(分别为42.9%和1.7%).结论PCR可用于虫株负荷量较低时的PCP诊断,对判断PCP病情及疗效考核亦有一定的帮助.
关键词: 肺炎 卡氏肺孢子虫 环六亚甲基四胺银染色 聚合酶链反应 半套式聚合酶链反应 -
半套式聚合酶链反应检测牛奶中部分肠道致病菌
目的建立一套食物中的单核细胞增生性李斯特氏菌、耶尔森氏菌和副溶血性弧菌等肠道致病菌的快速检测方法.方法采用裂解法提取DNA与各自的三条引物进行二次聚合酶链反应扩增(简称半套式PCR),检测模拟阳性牛奶中部分肠道致病菌.结果常规PCR能检出100个活菌的存在,在其产物进行半套式PCR检测时有10个活菌存在时即可扩增出特异性产物,提高10倍.低检测限可达10 cfu(集落形成单位).结论本方法具有特异性强、敏感性高、简便快速等特点.
关键词: 半套式聚合酶链反应 单核细胞增生性李斯特氏菌 耶尔森氏菌 副溶血性弧菌 牛奶